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诱导pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2对人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1凋亡的影响

作　者: 余天
导　师: 孙旭芳；张虹
学　校: 华中科技大学
专　业: 眼科
关键词: 脉络膜黑色素瘤细胞凋亡过氧化氢 Egr1 Omi/HtrA2 XIAP
分类号: R739.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:脂质体转染法将pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2质粒转入人眼脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1),研究过氧化氢诱导其表达后对人眼脉络膜黑色素瘤细胞凋亡的影响,探讨pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2自由基诱导特性及其对人眼脉络膜黑色素瘤细胞的杀伤作用。方法:用脂质体转染法转染人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞,将转染pcDNA3.1-Egr1-EGFP细胞设为对照组,转染pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2细胞设为实验组。予以过氧化氢刺激后,荧光显微镜观察两组细胞前后荧光表达变化,MTT法检测两组细胞的增殖状况,Western免疫印迹法比较对照组和实验组Omi/HtrA2以及XIAP蛋白的表达情况,Annexin V-FITC/PI双标后用流式细胞仪观察两组细胞凋亡的改变。结果:过氧化氢诱导后,实验组、对照组表达荧光细胞数均较诱导前增加,差异有统计学意义(P<0.05),实验组细胞增殖率较对照组下降,Omi/HtrA2基因表达在蛋白水平较对照组增高53.5%,XIAP蛋白与对照组比较下降31.9%,流式细胞仪分析显示,诱导后,实验组与对照组比较,凋亡率显著增高,差异有统计学意义(p<0.01)。结论:诱导转染pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2质粒表达可引起人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞凋亡,可能与Omi/HtrA2蛋白增高引起的XIAP降低有关。

全文目录

英文缩略词表  5-7
摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-10
材料和方法  10-19
结果  19-20
附图  20-26
讨论  26-27
结论  27-28
参考文献  28-30
综述  30-48
  参考文献  41-48
致谢  48

诱导pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2对人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1凋亡的影响

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