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Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响

作　者: 李然
导　师: 刘红林
学　校: 南京农业大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: Foxol 颗粒细胞 细胞凋亡 载体
分类号: S865.13
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


细胞凋亡是由体内外因素触发细胞内预存的死亡程序而导致的细胞死亡过程,是多细胞生物维持自身稳定的重要机制。卵泡闭锁的本质是颗粒细胞和卵母细胞的凋亡。转录因子Foxo1主要通过转录调控和信号转导途径在动物的生长发育、代谢和细胞周期、凋亡等方面起重要作用。本实验主要通过构建FOXO1真核表达质粒,在小鼠颗粒细胞中过表达FOXO1,从而研究Foxo1对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,探索卵泡闭锁的分子机理。实验结果表明：①正常情况下,小鼠颗粒细胞表达Foxol蛋白,Foxo1在颗粒细胞中的分布与其磷酸化状态紧密相关,未磷酸化的Foxo1蛋白位于细胞核中,而磷酸化的Foxo1蛋白明显出核,位于细胞质中；②通过脂质体转染成功实现了外源FOXO1基因在小鼠颗粒细胞内的表达；③转染36小时后,颗粒细胞形态发生变化,AnnexinV-PI细胞凋亡染色和Caspase-8活性测定说明FOXO1过表达促进颗粒细胞凋亡,并依赖于FOXO1与DNA的结合;④Real-time PCR结果表明FOXO1的过表达提高了颗粒细胞TRAIL、FasL、Bim、Caspase-3基因的mRNA水平表达量。研究证实,转录因子Foxol在颗粒细胞凋亡过程中起重要作用,且Foxo1的促凋亡作用可能是通过直接或间接调控TRAIL、Fas L、Bim、Caspase-3基因的表达量,因而Foxol可能参与了卵泡闭锁的调控,在卵泡闭锁过程中起重要作用。

全文目录


摘要  7-8ABSTRACT  8-9缩略语的中英文对照  9-10第一部分 文献综述  10-36  第一章 卵泡闭锁与细胞凋亡的研究进展  10-18    1 细胞凋亡研究进展  10-13    2 卵泡闭锁  13-18      2.1 卵泡闭锁的特征  13-14      2.2 卵泡细胞凋亡的调控  14-17      2.3 闭锁的调控因素  17-18  第二章 Foxo家族的研究进展  18-32    1 Foxo转录因子的结构与基因表达  18-19      1.1 Fox蛋白的命名和分类  18-19      1.2 O亚家族(FoxO)及基因表达  19    2 Foxo1转录因子活性的调节  19-21      2.1 Foxo1的共价修饰  19-21      2.2 Foxo1蛋白的降解  21    3 Foxo1的靶基因及其相关的生物学功能  21-32      3.1 Foxo1参与细胞代谢调节  21      3.2 Foxo1参与细胞周期的调节  21-22      3.3 Foxo1参与凋亡的调节  22-29      3.4 Foxo1与肿瘤的发生  29-32  第三章 质粒转染方法的研究进展  32-36第二部分 实验部分  36-58  1 材料与方法  36-44    1.1 实验材料  36-38    1.2 实验方法  38-44  2 实验结果  44-55    2.1 小鼠卵巢颗粒细胞的培养  44-45    2.2 Foxo1在小鼠颗粒细胞中的表达与分布  45-46    2.3 FOXO1在培养小鼠颗粒细胞中的过表达  46-47    2.4 FOXO1过表达对小鼠颗粒细胞凋亡的影响  47-50    2.5 FOXO1过表达对小鼠颗粒细胞凋亡基因表达的影响  50-55  3 讨论  55-58    3.1 Foxo1与颗粒细胞凋亡  55-56    3.2 Foxo1诱导颗粒细胞凋亡的机理  56-58全文结论  58-60参考文献  60-70附录  70-74致谢  74

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 狩猎、野生动物驯养 > 各种野生动物驯养 > 实验用动物 > 小白鼠
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