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吡柔比星对鼻咽癌细胞株CNE2生长和XIAP表达的影响

作　者: 刘静
导　师: 蒋常文
学　校: 桂林医学院
专　业: 病理与病理生理学
关键词: 鼻咽癌 XIAP 吡柔比星 MTT 免疫细胞化学
分类号: R739.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的X连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP）在许多肿瘤中均高表达,而它在正常分化成熟组织中不表达或低表达,与肿瘤的发生发展有十分密切的关系。探讨化疗药物吡柔比星对鼻咽癌细胞株CNE2增殖、克隆形成和凋亡抑制基因XIAP mRNA和蛋白表达的影响,为鼻咽癌治疗与研究提供新的靶点。方法体外培养鼻咽癌细胞株CNE2,于37℃,5%CO₂的培养箱中培养,细胞对数生长期时加入不同浓度的吡柔比星处理后,用MTT法检测细胞增殖情况;采用克隆形成实验观察细胞克隆形成;用RT-PCR方法检测鼻咽癌细胞株XIAP mRNA的表达情况;制作细胞爬片做免疫细胞化学了解细胞株XIAP蛋白的表达。应用SPSS 11.0软件进行统计学处理,采用方差分析（ANOVA）,P <0.05为差异具有统计学意义。结果MTT结果显示加入临床用药浓度1倍、临床用药浓度的1/10倍、临床用药浓度的1/100倍作用24h对细胞的抑制率分别为74±0.3%、39±0.5%、13±0.2%;作用48h对细胞的抑制率分别为83±0.4%、77±1.1%、19±0.5%。因此,吡柔比星对细胞的抑制作用具有明显的时效和量效关系。克隆形成实验结果表明1倍临床用药量细胞克隆数（90±5）、1/10倍临床用药量细胞克隆数（264±8）与对照组细胞克隆数（403±10）相比有显著性意义（P﹤0.05）。随着药物浓度的增加而克隆数减少,克隆变小。RT-PCR法检测显示XIAP mRNA表达下调,对照组、加临床用药量1/10组及加临床用药量1倍组XIAP与β-actin的比值分别为0.97±0.015、0.53±0.020、0.18±0.011。经统计学处理,三组之间P﹤0.05均有统计学意义。免疫细胞化学结果提示XIAP蛋白在胞浆和胞核中均有表达,加药组与对照组相比较,XIAP蛋白表达明显下调且药物浓度越大下调作用越明显。结论1吡柔比星可抑制体外培养的鼻咽癌细胞株CNE2的增殖,此细胞株对吡柔比星具有很好的敏感性。2吡柔比星可下调鼻咽癌细胞株CNE2中XIAP mRNA和蛋白的表达。3吡柔比星对鼻咽癌细胞株CNE2的抑制作用与XIAP表达下调有关。4吡柔比星对咽癌细胞的作用值得进一步研究,本研究将会为鼻咽癌的治疗与研究开辟新的思路。

吡柔比星对鼻咽癌细胞株CNE2生长和XIAP表达的影响

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