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缺氧后处理影响肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体途径凋亡机制的研究

作　者: 王理想
导　师: 伍火志
学　校: 遵义医学院
专　业: 心胸外科
关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 凋亡 缺氧后处理 线粒体途径
分类号: R563.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 8次
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内容摘要


目的：探讨缺氧后处理影响肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体途径凋亡的机制,为研究急性肺损伤保护措施提供新的实验依据。方法：将传3代培养的人肺泡Ⅱ型上皮细胞系(A549细胞)随机分成3组,每组6个标本,分别为常氧(Normoxia)组、缺氧复氧(H/R)组和缺氧后处理(H-PostC)组。②Normoxia组(37℃,5% CO2,95% air)在培养箱中培养24h；②H/R组缺氧(37℃,5% CO2,95% N2)12h后再复氧(37℃,5%CO2,95% air) 12h;③H-PostC组缺氧(37℃,5%CO2,95%N2)12h后给予重复三次的5min复氧/5min缺氧的后处理,继以恢复氧供(5%CO2,95%air)12h。实验前后在倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学改变；利用流式细胞仪检测各组A549细胞的凋亡率；RT-PCR检测Bax、Bcl-2基因的表达量。结果：①细胞形态学变化：Normoxia组：可见胞体呈梭形,细胞明亮,紧贴瓶底,无悬浮细胞；H/R组：胞体变圆,细胞间隙增宽,培养上清液中可见漂浮的细胞和细胞碎片；H-PostC:少部分细胞胞体变圆,细胞间隙稍增宽。②细胞凋亡率(%)：三组间检测指标比较,差异均显著(P<0.05)。与Normoxia组(0.3000±0.1276)比较,I/R组(7.2517±1.2648)明显升高(p<0.05)；而H-PostC组(4.1783±1.0364)则明显低于I/R组(p<0.05)。③Bax基因的表达：三组间比较,差异均有显著性(P<0.05)；与Normoxia组(12.4733±1.0657)比较,H/R组(22.6800±0.3628)明显升高(p<0.05)；而H-PostC组(16.9583±0.6151)则明显低于H/R组(p<0.05)。④Bcl-2基因的表达：三组间比较,差异均显著(P<0.05)。与Normoxia组(27.4583±0.8504)比较,H/R组(17.9683±0.5299)明显降低(p<0.05)；而H-PostC组(23.1117±0.3676)则明显高于于H/R组(p<0.05)。⑤Bax与Bcl-2基因表达的相关性分析：Bax与Bcl-2基因的表达成负相关(r=-0.765,p<0.01)2.缺氧后处理能明显减少肺泡Ⅱ型上皮细胞的凋亡,线粒体途径参与其凋亡过程。

全文目录


英汉缩略词对照表  6-8摘要  8-10Abstract  10-12前言  12-14材料与方法  14-21结果  21-26讨论  26-31结论  31-32参考文献  32-37综述  37-48  参考文献  42-48致谢  48-49作者简历  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病 > 肺疾病 > 呼吸衰竭
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