学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

Urocortin后处理对缺血大鼠心肌线粒体凋亡通路的影响

作　者: 欧袁
导　师: 杨双强
学　校: 重庆医科大学
专　业: 外科学
关键词: Urocortin 心肌缺血再灌注损伤心肌保护细胞凋亡
分类号: R541
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 48次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的研究Urocortin(UCN)后处理对缺血再灌注大鼠心肌线粒体凋亡通路的影响。方法将24只Wistar大鼠随机分为3组,每组8只,即对照组(CON组)、缺血/再灌注(I/R组)及Urocortin后处理组(UCN组)。CON组:大鼠麻醉后,直接开胸取左心室肌作缺血前对照。I/R组:建立离体心脏Langendorff-Neely模型,灌注K-H缓冲液30 min后,于主动脉根部灌注4℃的St.Thomas-2心脏停搏液,使心脏停跳并低温下维持30min,复灌K-H缓冲液90min后,取左心室肌备检。UCN组:处理同I/R组,仅于复灌时复灌UCN浓度为10-8 mol/L的K-H缓冲液90min,取左心室肌备检。用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组心肌细胞线粒体凋亡通路的标志性蛋白细胞色素C(CytoC)从线粒体的释放。用免疫组化染色法(IH)检测各组心肌细胞中Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。用原位末端转移酶标记法( TUNEL)检测各组心肌细胞的凋亡。结果Western blot检测显示,CON组、I/R组和UCN组胞浆中CytoC的相对蛋白含量分别为56.7±2.63%、129.4±2.79%和88.1±2.25%。与缺血前比较,I/R组和UCN组胞浆中CytoC的含量均明显增高(P<0.05);再灌注后UCN组胞浆中CytoC的量低于I/R组(P<0.05)。提示缺血再灌注后,有CytoC自心肌细胞线粒体释放;经UCN后处理后,可明显抑制CytoC的释放。免疫组化染色显示,CON组、I/R组和UCN组Caspase-3蛋白的表达量分别为0.15±0.05、0.36±0.07和0.24±0.06,I/R组和UCN组高于CON组(P<0.05),UCN组低于I/R组(P<0.05)。提示缺血再灌注后,心肌组织Caspase-3蛋白的表达较缺血前明显增加;经UCN后处理后,明显抑制了Caspase-3蛋白的表达。免疫组化染色结果显示,CON组、I/R组和UCN组Bcl-2蛋白的表达量分别为0.077±0.05、0.12±0.06和0.20±0.05,I/R组和UCN组高于CON组(P<0.05),UCN组高于I/R组(P<0.05)。提示缺血再灌注后,心肌组织Bcl-2蛋白的表达较缺血前明显增加;经UCN后处理后,心肌组织Bcl-2蛋白的表达较I/R组明显增加。与缺血前比较,缺血再灌注后心肌凋亡细胞数明显增多,心肌细胞凋亡指数I/R组(12.81±0.62%)和UCN组(6.77±1.12%)均高于CON组(2.29±0.67%,P<0.05);再灌注后UCN组低于I/R组(P<0.05)。提示与缺血前相比,再灌注后心肌细胞凋亡明显增多;UCN后处理明显抑制了心肌细胞凋亡。胞浆中CytoC含量与Caspase-3蛋白表达呈正相关(r=0.796,P<0.05);胞浆中CytoC含量与心肌细胞凋亡指数呈正相关(r=0.956,P<0.05)。后处理通过增加心肌细胞Bcl-2蛋白的表达,抑制心肌细胞线粒体释放CytoC等促凋亡因子至胞浆,进而抑制心肌Caspase-3的活化来实现,减少大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的数量,具有一定得心肌保护作用。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-7
中文摘要  7-10
英文摘要  10-13
论文正文：Urocortin 后处理对缺血大鼠心肌线粒体凋亡通路的影响  13-34
  前言  13-15
  材料与方法  15-23
  结果  23-29
  讨论  29-34
结论  34-35
参考文献  35-38
附图  38-42
文献综述  42-49
致谢  49-50
攻读硕士学位期间发表的学术论文  50

Urocortin后处理对缺血大鼠心肌线粒体凋亡通路的影响

内容摘要

全文目录

相似论文