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优化核酸疫苗对帕金森病小鼠炎症反应影响的实验研究
作 者: 陈中美
导 师: 彭国光
学 校: 重庆医科大学
专 业: 神经病学
关键词: 帕金森病 优化核酸疫苗 免疫 神经保护 炎症
分类号: R742.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 14次
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内容摘要
目的1.观察慢性MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应的病理情况。2.评价优化核酸疫苗(pVAX1-IL-4/SYN-B)预防接种对小鼠MPTP损害的神经保护作用。3.探讨优化核酸疫苗免疫对MPTP帕金森病小鼠模型炎症反应的影响特点,进一步评价优化核酸疫苗预防免疫的有效性和安全性。方法抽取并制备足量pVAX1-IL-4/SYN-B和pVAX1。将C57BL/6正常小鼠随机分为正常对照组、PBS模型组、空质粒模型组、优化核酸疫苗模型组4组,分别在小鼠双后肢胫前肌肌注PBS、PBS、空质粒、pVAX1-IL-4/SYN-B各100ul进行预防免疫,共免疫3次。末次注射3周后,后3组背部皮下注射MPTP构建慢性帕金森病小鼠模型,正常对照组注射同体积的PBS。末次给药后观察小鼠行为学变化;免疫组织化学、Western blot检测小鼠黑质部TH、CD11b、 COX-2表达情况;RT-PCR检测小鼠黑质TNF-α、IL1-β炎症因子mRNA水平。结果1.在预防免疫接种阶段,未发现小鼠行为异常。但在采用MPTP构建帕金森病小鼠模型过程中,各模型组小鼠出现尾巴上翘、僵硬,肢体抖动、强直,活动减少、缓慢,躯体蜷缩、震颤等类帕金森病样症状。与PBS模型组和空质粒模型组相比,优化核酸疫苗模型组小鼠上述行为学异常有明显改善。2.免疫组织化学显示各模型组小鼠黑质TH神经元明显减少,Western Blot结果和免疫组化一致。优化核酸疫苗模型组TH丢失较PBS模型组和空质粒模型组明显减少,差异有统计学意义。3.免疫组织化学显示各模型组小鼠黑质及皮质等部位有大量CD11b、COX-2炎症细胞侵润;与PBS模型组和空质粒模型组相比,优化核酸疫苗模型组CD11b、COX-2细胞数及蛋白定量水平明显减少,差异有统计学意义。4.RT-PCR显示:优化核酸疫苗模型组TNF-α、IL1-β炎症介质的mRNA水平较PBS模型组、空质粒模型组表达明显降低;差异有统计学意义。结论从以上结果可以看出各模型组小鼠表现出类帕金森病样症状,TH神经元明显减少,说明慢性MPTP帕金森病模型构建成功;各模型组中炎症细胞及炎症介质的表达表明MPTP诱导小鼠中脑黑质产生了炎症反应;pVAX1-IL-4/SYN-B预防性免疫减少了MPTP模型小鼠黑质TH神经细胞的丢失及炎症因子和炎症细胞表达,对MPTP诱导的小鼠慢性损害有一定的保护及抗炎作用,为优化核酸疫苗的进一步在临床上的应用研究奠定了理论基础。
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全文目录
符号说明 5-6 摘要 6-9 ABSTRACT 9-13 前言 13-15 1. 材料与方法 15-34 2. 结果 34-41 3. 讨论 41-44 4. 全文总结 44-45 参考文献 45-49 文献综述 49-57 参考文献 55-57 致谢 57-58 攻读学位期间发表的学术论文 58-59
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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑部疾病 > 震颤麻痹综合征
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