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壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾免疫因子、卵黄蛋白原基因表达和性腺发育的影响

作　者: 李郁娇
导　师: 朱春华
学　校: 广东海洋大学
专　业: 海洋生物学
关键词: 罗氏沼虾 壬基酚 三丁基锡 免疫 卵黄蛋白原 性腺
分类号: S945
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


采用分子生物学、组织学和显微技术相结合的方法,研究低(0.1mg/L)、中(0.2mg/L)、高(0.4 mg/L)三种剂量的壬基酚(Nonylphenol, NP)和三丁基锡(Tributyltin, TBT)暴露对罗氏沼虾免疫因子、卵黄蛋白原基因表达和性腺发育的影响。主要结果如下:1、壬基酚与三丁基锡暴露对罗氏沼虾SOD、ACP、AKP活性的影响罗氏沼虾在NP中暴露48h。高剂量组血清SOD活力在前期受到明显抑制(P<0.05),24h后各剂量组血清SOD活力转为促进,中、高剂量组的SOD活力显著高于对照组(P<0.05)。中、低剂量组血清ACP活力均受到抑制,其中12h低剂量组血清ACP活力显著降低(P<0.05),高剂量组则表现为先促进后抑制的效应。各剂量组血清AKP活力先抑制后转为促进,48h中、低剂量组血清AKP活力显著高于对照组(P<0.05)。罗氏沼虾在TBT中暴露48h。低剂量组血清SOD活力12h被显著抑制(P<0.05),48h则转为促进作用。中、低剂量组ACP活力24h内均被显著抑制(P<0.05),而高剂量组血清ACP活力短暂降低后转为促进,48h后血清ACP活性显著高于对照组(P<0.05)。中、高剂量组血清AKP活力前期显著降低(P<0.05),而低剂量组血清AKP活力则显著升高(P<0.05),48h各剂量组均被促进,中、高剂量组血清AKP活力与对照组比较差异显著(P<0.05)。2、壬基酚与三丁基锡暴露对罗氏沼虾卵黄蛋白原基因表达的影响NP暴露各剂量组对罗氏沼虾雌虾肝胰腺和卵巢中VTG基因表达均表现为诱导作用,低剂量组的诱导作用大于中、高剂量组;NP对罗氏沼虾雄虾肝胰腺和精巢VTG基因的表达也表现为诱导作用,肝胰腺中存在剂量效应关系,剂量越高诱导作用越明显,精巢中则表现为中、低剂量组的诱导作用明显。TBT暴露能够诱导罗氏沼虾雌虾肝胰腺VTG基因的表达,而对卵巢VTG基因的表达则表现为抑制作用。TBT暴露对罗氏沼虾雄虾肝胰腺VTG基因表达表现为抑制作用,对精巢VTG基因的表达无明显影响。3、壬基酚与三丁基锡暴露对罗氏沼虾性腺发育的影响NP暴露能够抑制罗氏沼虾精巢和卵巢的发育,随着暴露时间的延长对精巢和卵巢发育的抑制作用逐步增强,时间效应关系明显。TBT暴露能够诱导罗氏沼虾精巢的发育,随暴露时间的延长对精巢发育的促进作用逐步增强,但对罗氏沼虾卵巢发育无显著影响。

全文目录


摘要  6-7Abstract  7-111 综述  11-18  1.1 罗氏沼虾的研究进展  11-12  1.2 壬基酚的研究进展  12-14    1.2.1 壬基酚对水生生物免疫因子的影响  12-13    1.2.2 壬基酚对水生生物卵黄蛋白原基因表达的影响  13-14    1.2.3 壬基酚对水生生物性腺发育的影响  14  1.3 三丁基锡的研究进展  14-16    1.3.1 三丁基锡暴露对水生生物免疫因子的影响  15    1.3.2 三丁基锡对水生生物卵黄蛋白原基因表达的影响  15-16    1.3.3 三丁基锡对水生生物性腺发育的影响  16  1.4 研究目的和意义  16-182 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾免疫因子的影响  18-27  2.1 材料与方法  18-20    2.1.1 罗氏沼虾预处理及分组  18    2.1.2 实验仪器和试剂  18-19    2.1.3 壬基酚与三丁基锡母液的配制  19    2.1.4 罗氏沼虾血淋巴抗凝剂的配制  19    2.1.5 罗氏沼虾血淋巴的抽取  19    2.1.6 免疫酶活性的测定  19-20    2.1.7 数据处理  20  2.2 结果  20-23    2.2.1 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾血清中SOD 活力的影响  20-21    2.2.2 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾血清中ACP 活力的影响  21-22    2.2.3 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾血清中AKP 活力的影响  22-23  2.3 讨论  23-273 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾VTG 基因表达的影响  27-42  3.1 材料与方法  27-31    3.1.1 罗氏沼虾预处理及分组  27    3.1.2 实验仪器和试剂  27-28    3.1.3 Trizol 试剂盒提取RNA  28-29    3.1.4 cDNA 第一链合成  29    3.1.5 引物设计  29-30    3.1.6 PCR 反应体系及反应条件  30    3.1.7 数据处理  30-31  3.2 结果  31-39    3.2.1 总RNA 的提取和最佳循环次数的确定  31    3.2.2 壬基酚对罗氏沼虾雌虾肝胰腺中VTG 基因表达的影响  31-32    3.2.3 壬基酚对罗氏沼虾卵巢中VTG 基因表达的影响  32-33    3.2.4 壬基酚对罗氏沼虾雄虾肝胰腺中VTG 基因表达的影响  33-34    3.2.5 壬基酚对罗氏沼虾精巢中VTG 基因表达的影响  34-35    3.2.6 三丁基锡对罗氏沼虾雌虾肝胰腺中VTG 基因表达的影响  35-36    3.2.7 三丁基锡对罗氏沼虾卵巢中VTG 基因表达的影响  36-37    3.2.8 三丁基锡对罗氏沼虾雄虾肝胰腺中VTG 基因表达的影响  37-39    3.2.9 三丁基锡对罗氏沼虾精巢中VTG 基因表达的影响  39  3.3 讨论  39-424 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾性腺发育的影响  42-47  4.1 材料与方法  42-44    4.1.1 罗氏沼虾预处理及分组  42    4.1.2 实验仪器和试剂  42    4.1.3 基础试剂的配制  42-43    4.1.4 实验步骤  43-44  4.2 结果  44    4.2.1 壬基酚对罗氏沼虾精巢的影响  44    4.2.2 壬基酚对罗氏沼虾卵巢的影响  44    4.2.3 三丁基锡对罗氏沼虾精巢的影响  44    4.2.4 三丁基锡对罗氏沼虾卵巢的影响  44  4.3 讨论  44-475 结论  47-48  5.1 壬基酚对罗氏沼虾SOD、ACP、AKP 活力的影响  47  5.2 三丁基锡对罗氏沼虾SOD、ACP、AKP 活力的影响  47  5.3 壬基酚对罗氏沼虾卵黄蛋白原基因表达的影响  47  5.4 三丁基锡对罗氏沼虾卵黄蛋白原基因表达的影响  47  5.5 壬基酚对罗氏沼虾性腺发育的影响  47  5.6 三丁基锡对罗氏沼虾性腺发育的影响  47-48参考文献  48-60图版及说明  60-64致谢  64-65作者简介  65-66导师简介  66

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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 甲壳类病虫害及其防治
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