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秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞的影响及机制研究

作　者: 王坚
导　师: 章永红
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 秋水仙素 乳腺癌 MCF-7 MDA-MB-231 抑制增殖 细胞凋亡
分类号: R273
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


本课题旨在通过理论研究和体外实验,探讨秋水仙素在抑制乳腺癌细胞增殖,促进其凋亡的作用及机制,在前述实验基础上,进一步探讨中医乳腺癌病因病机,阐明中医病因、病机的合理性及抗癌解毒治则的分子机理,为临床抗乳腺癌应用提供新的可能性。理论研究方面,首先概述了现代医学治疗乳腺癌进展。其次阐述了中医对于乳腺癌病因病机的认识,从中提炼出“癌毒”这一特殊病理因素,阐述了癌毒与乳腺癌发生、发展、治疗、预后的关系,确立了乳腺癌的重要法则之一为解毒抗癌。最后介绍了导师章永红教授在治疗乳腺癌临床实践中常用解毒中药光慈菇的概况及提取物秋水仙素的抗癌机制的研究进展。实验研究方面,针对秋水仙素治疗乳腺癌的作用机制进行了多项实验。实验一：MTT法观察秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用。结果：随着秋水仙素浓度的增高及用药时间的延长,对乳腺癌MCF-7细胞及MDA-MB-231细胞产生抑制的作用逐渐增强。与阴性对照组比较,除剂量为0.3125ug/ml、0.625ug/ml,作用时间24小时的两组无统计学意义外,其余各组均有显著统计学意义(P<0.01)。另两组细胞相比,同样浓度秋水仙素作用同样时间后对MDA-MB-231细胞的抑制率高于乳腺癌MCF-7细胞。实验二：流式细胞仪检测秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞凋亡的影响。结果：人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞经过不同浓度的秋水仙素处理24h、48h、72h后,各组均呈现不同程度的凋亡,且凋亡率随着剂量的增加、时间的延长而逐渐增多。两种细胞相比,同样浓度秋水仙素作用同样时间后乳腺癌MDA-MB-231细胞总凋亡率高于乳腺癌MCF-7。实验三：流式细胞仪检测秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞增殖周期的影响。结果：秋水仙素在40ug/ml量、作用72h时具有统计学差异,两种细胞凋亡率最高,达18.97%、9.81%,与正常对照组比较,G0/G1期细胞比率随作用时间延长在逐渐减少,G2/M期的细胞比率随作用时间延长在逐渐增加,细胞生长周期较明显地停滞在G2/M期,具有明显时间依赖性。结论：秋水仙素可以抑制人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有明显的量-效与时-效关系。细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用可能与G2/M期有关。两种细胞作用结果相比秋水仙素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞抑制增殖作用及诱导细胞凋亡能力更强。

全文目录


目录  5-7
摘要  7-8
Abstract  8-10
前言  10-11
第一章 理论研究  11-25
  第一节 乳腺癌的现代医学研究进展  11-19
    1 外科治疗  11-12
    2 放射治疗  12
    3 细胞毒化疗  12-14
    4 内分泌治疗  14-16
    5 分子靶向治疗  16-19
  第二节 中医药治疗乳腺癌的研究进展  19-23
    1 病因病机  19-20
    2 “癌毒”学说在治疗乳腺癌中的应用  20-21
    3 中医药抗乳腺癌细胞作用机制的研究现状  21-22
    4 展望  22-23
  第三节 光慈菇提取物秋水仙素抗癌作用研究进展  23-25
    1 光慈菇的概况  23
    2 秋水仙素的抗癌活性及机制研究  23-24
    3 展望  24-25
第二章 实验研究  25-49
  第一节 MTT法观察秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用  25-32
    1 实验材料与仪器  25-26
    2 实验方法  26-28
    3 实验结果  28-30
    4 讨论  30-32
  第二节 流式细胞仪检测秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞凋亡的影响  32-43
    1 实验材料与仪器  32
    2 实验方法  32-33
    3 实验结果  33-42
    4 讨论  42-43
  第三节 流式细胞仪检测秋水仙素对人乳腺癌MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞增殖周期的影响  43-49
    1 实验材料与仪器  43
    2 实验方法  43-44
    3 实验结果  44-47
    4 讨论  47-49
结论及展望  49-50
  一、研究总结  49
  二、展望  49-50
参考文献  50-55
攻读硕士学位期间取得的学术成果  55-56
致谢  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医肿瘤科
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