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大鼠脑缺血再灌注后Cathepsin B介导的细胞凋亡与P38MAPK信号通路的关系
作 者: 黎奕
导 师: 张智博
学 校: 南华大学
专 业: 神经病学
关键词: 凋亡 脑缺血再灌注 CathepsinB P38MAPK CA-074
分类号: R743.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 108次
引 用: 1次
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内容摘要
背景与目的:脑缺血再灌注后缺血半暗带区会发生细胞凋亡。P38MAPK、Cathepsin B参与了凋亡的过程。本研究通过Cathepsin B特异性抑制剂CA-074对大鼠脑缺血再灌注模型的干预来检测P-P38与Cathepsin B蛋白的表达,从而研究两者之间的关系。方法:体重为280±20g,10-12周龄清洁级健康雄性大鼠56只,分为假手术组(n=6)、脑缺血再灌注模型组(n=25)和CA-074干预组(n=25)。脑缺血再灌注模型组和CA-074干预组根据再灌注时间又分为再灌注2h、6h、12h、24h四个亚组,再灌注2h、6h、12h各5只,再灌注24h10只。。干预组的制备,先采用侧脑室注射方法给予20ugCA-074/1ulDMSO,半小时后线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MACO)模型;模型组与假手术组的制备,先采用侧脑室注射方法给予1ulDMSO,半小时后线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MACO)模型。利用神经功能评分标准评估神经功能缺失变化;利用TTC染色、免疫组化、TUNEL法分别检测脑梗死体积变化、脑皮质区P-P38与Cathepsin B蛋白的表达和脑皮质区细胞凋亡变化。结果:1.TTC结果:模型组24h相对梗死体积为24.73±0.97%,干预组24h相对梗死体积为13.46±0.64%,差异有显著性(P<0.05)。2.缺血再灌注脑组织中P38MAPK水平的表达。假手术组:未见明显的P-P38免疫活性表达;模型组:2h时就可看到少量的P-P38,6h达到高峰,12h与24h下降;干预组:各个时间点P-P38免疫活性表达与同期的模型组相比减少,差异有显著性(P<0.05)。3.缺血再灌注脑组织中Cathepsin B水平的表达。假手术组:未见明显的Cathepsin B免疫活性表达;模型组:2h时就可看到少量的Cathepsin B,6h达到最高峰,12h与24h下降;干预组:各个时间点Cathepsin B免疫活性表达与同期的模型组相比减少,差异有显著性(P<0.05)。4.TUNEL法结果。假手术组:可见少量凋亡细胞;模型组:呈时间依赖性,于再灌注后2h缺血侧缺血半暗带可以观察到凋亡细胞明显增多,至24h达高峰,各时间点的差异均有显著性(P<0.05);干预组:干预后可以显著减少大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡细胞数量,与模型组相比,干预组除了再灌注后2h外其它时间点凋亡细胞数均明显减少(P<0.05)。结论:大鼠脑缺血再灌注后溶酶体Cathepsin B可能通过P38MAPK信号通路介导细胞凋亡。
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全文目录
中文摘要 4-6 ABSTRACT 6-8 第一章 前言 8-10 第二章 材料与方法 10-14 第三章 结果 14-23 第四章 讨论 23-29 第五章 结论 29-30 参考文献 30-37 主要缩略词表 37-38 综述 38-48 参考文献 43-48 攻读硕士学位期间发表的论文及参与的科研课题 48-49 致谢 49
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中图分类: > 医药、卫生 > 神经病学与精神病学 > 神经病学 > 脑血管疾病 > 急性脑血管疾病(中风)
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