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E1A抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其分子机制的研究
作 者: 陈嘉
导 师: 何国平
学 校: 中南大学
专 业: 护理学
关键词: E1A MCF-7 HER-2 细胞凋亡
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
研究背景乳腺癌是最为常见的女性恶性肿瘤,其发病率呈上升趋势。临床研究发现20%-30%的乳腺癌病人中存在人表皮生长因子受体-2(human epithelial growth factor receptor-2, HER-2)基因的表达增强,而且与乳腺癌的发生、侵袭转移、治疗效果和预后转归密切相关。E1A基因是近年来新发现的一种具有抑癌作用的基因,在肿瘤的基因调控和治疗方面发挥重要的作用,在宫颈癌和卵巢癌中能抑制HER-2基因和激活某些抑癌基因如p53基因等的表达,并与一些肿瘤细胞对放、化疗的敏感性有关。本研究利用脂质体介导,将E1A基因转染HER-2表达阳性的乳腺癌细胞系MCF-7,并研究E1A对MCF-7细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法:利用基因转染技术检测MCF-7细胞中E1A的表达,RT-PCR和Western杂交检测E1A基因对HER-2mRNA和蛋白表达水平的调控,MTT法检测E1A对MCF-7细胞增殖的抑制作用,软琼脂集落法检测E1A对MCF-7细胞集落形成的影响,并利用流式细胞术检测E1A对MCF-7细胞凋亡的调控。结果MCF-7细胞无内源性的E1A表达,E1A在MCF-7细胞内的表达显著性地降低了细胞中HER-2mRNA和蛋白表达水平,诱导MCF-7细胞发生凋亡。细胞增殖曲线显示E1A基因显著性抑制MCF-7细胞增殖和细胞集落形成能力。E1A基因对HER-2的抑制通过上调caspase-3途径实现。结论:E1A基因能降低人乳腺癌细胞MCF-7的HER-2表达,通过HER-2/caspase-3途径抑制细胞的增殖和细胞集落形成能力。
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全文目录
中文摘要 4-6 ABSTRACT 6-9 縮略词表 9-10 前言 10-12 材料和方法 12-19 2.1 材料 12-13 2.2 溶液配制 13-14 2.3 方法 14-18 2.4 统计学方法 18-19 结果 19-26 3.1 E1A基因的表达鉴定及其对HER-2基因表达的影响 19-22 3.2 MTT法检测E1A基因对人乳腺癌细胞细胞增殖的影响 22 3.3 集落形成法检测E1A基因对人乳腺癌细胞集落形成能力的影响 22-24 3.4 E1A基因对MCF-7细胞凋亡的诱导作用 24 3.5 E1A基因对Caspase-3活性的上调 24-26 讨论 26-28 结论 28-29 参考文献 29-33 综述 33-40 参考文献 36-40 致谢 40-41 在读期间发表的论文 41
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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