学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

PPARβ在EGF抑制TNF-α导致HaCat细胞凋亡中的机制研究

作　者: 梁鹏飞
导　师: 黄晓元
学　校: 中南大学
专　业: 烧伤整形外科学
关键词: 创面修复 细胞凋亡 HaCat细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体-β 肿瘤坏死因子-α 表皮生长因子
分类号: R644
类　型: 博士论文
年　份: 2006年
下　载: 171次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


第一部分 TNF-α诱导HaCat细胞凋亡及PPARβ的活化 目的：探讨TNF-α导致HaCat细胞凋亡中，TNF-α对PPAR β表达时空和转录活性的影响。 方法：采用Hoechst 33258染色后观察凋亡细胞的形态学改变，并计算凋亡细胞百分率，利用caspase活性定量检测试剂盒分析caspase-3，8，9的活性变化，MTT染色检测细胞的成活率，RT-PCR和Western-blot观察TNF-α导致PPAR β mRNA及其蛋白的改变，应用凝胶迁移滞留实验及荧光素酶报道基因分析TNF-α介导PPAR β的DNA结合活性及转录活性的改变。 结果：Hoechst 33258染色显示，HaCat细胞经TNF-α(10ng／mL)分别处理12h和24h后，细胞出现明显凋亡，形态学表现为细胞体积缩小，核固缩，镜下为浓染致密的颗粒块状荧光；HaCat细胞分别经5、10、20ng／mLTNF-α处理24h后，随TNF-α处理剂量的增加，凋亡细胞数增多，HaCat细胞经TNF-α处理6h后，Caspase-3，8，9的活性增加，细胞成活率降低。Western-blot显示：HaCat细胞经TNF-α处理6、12h后PPAR β的蛋白表达显著增加，HaCat细胞经不同浓度的TNF-α处理24h后PPAR β蛋白表达水平都增加；RT-PCR检测示TNF-α处理3、6h后PPAR β mRNA的表达增强。凝胶迁移滞留实验分析及荧光素酶报道基因分析表明TNF-α可以增强PPAR β的DNA的结合活性和转录活性。 结论：TNF-α可诱导HaCat细胞发生凋亡，TNF-α可增强PPARβ mRNA、蛋白水平的表达以及DNA结合活性和转录活性

全文目录


中文摘要  3-6
英文摘要  6-14
英文缩写注释  14-18
前言  18-24
技术线路  24-29
第一部分 TNF-α诱导Hacat细胞凋亡及PPAR-β的活化  29-64
  一 材料与方法  30-42
  二 实验结果  42-58
    1 TNF-α诱导Hacat细胞凋亡  42-50
    2 TNF-α诱导Hacat细胞中PPARβ的变化  50-54
    3 TNF-α增强Hacat细胞PPARβ核内与DNA的结合活性  54-55
    4 TNF-α增强Hacat细胞PPARβ的基因转录活性  55-58
  三 分析与讨论  58-63
  四 结论  63-64
第二部分 PPARβ在TNF-α诱导Hacat细胞凋亡中的作用  64-88
  一 材料与方法  65-68
  二 实验结果  68-84
    1 PPARβ反义寡核苷酸抑制HaCat细胞PPARβ的表达  68-70
    2 PPARβ反义寡核苷酸促进TNF-α介导的HaCat细胞凋亡  70-76
    3 PPARβ配体激动剂L165041抑制TNF-α介导的Hacat细胞凋亡  76-84
  三 分析与讨论  84-87
  四 结论  87-88
第三部分 PPARβ在EGF抑制TNF-α导致Hacat细胞凋亡中的作用  88-109
  一 材料与方法  90-92
  二 实验结果  92-104
    1 EGF抑制TNF-α介导的Hacat细胞凋亡  92-98
    2 EGF对PPAR β蛋白质及mRNA表达的影响  98-100
    3 EGF调节PPAR β的DNA结合活性  100-102
    4 EGF增强PPAR β核内转录活性  102-104
  三 分析与讨论  104-108
  四 结论  108-109
全文总结  109-110
参考文献  110-119
综述一 皮肤创伤修复的新靶点——PPARB  119-133
综述二 表皮生长因子受体的信号传导  133-148
攻读学位期间的主要成果  148-149
致谢  149

相似论文

  1. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  2. CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
  3. 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
  4. 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
  5. PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
  6. β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
  7. 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
  8. 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
  9. 猪TNF-α单克隆抗体制备与PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞TNF-α变化规律研究,S858.28
  10. 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
  11. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
  12. Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
  13. 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
  14. 动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型组织形态学和超微结构观察及颈椎间盘TNF-α、IL-1β的表达,R681.55
  15. 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1
  16. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导仓鼠肾细胞凋亡信号转导机制的研究,S856.9
  17. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导人结肠癌细胞凋亡线粒体信号转导机制的研究,R735.35
  18. 磷脂酶C和D在木聚糖酶诱导的水稻悬浮细胞抗病反应中的作用,S511
  19. 组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响,S828
  20. 榄香烯对人肝癌HepG-2细胞拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ的影响,R735.7
  21. sCD40L对白血病HL-60细胞株生物学行为的影响及机制,R733.7

中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 创伤外科学 > 烧伤及烫伤（灼伤）
© 2012 www.xueweilunwen.com