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生肌液对骨髓基质干细胞增殖、成骨活性和凋亡状态影响的研究

作　者: 冯俊奇
导　师: 白人骁；李秀兰
学　校: 天津医科大学
专　业: 骨科学
关键词: 骨髓基质干细胞生肌液凋亡增殖成骨活性
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 43次
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内容摘要

临床上由于骨折或其它原因引起的骨缺损很常见,且治疗困难,目前采用的自体骨和异体骨移植均有各自的不足之处,自体骨移植的骨量受到限制,另外也增加了病人的痛苦,而异体骨移植可能出现免疫排斥反应和其它的并发症。将组织工程化骨用于骨缺损的修复是临床治疗的趋势所在,即从病人体内取少量的种子细胞,经体外诱导及培养,使其在短时间内大量增殖,再复合以支架材料,植入病人的骨缺损处,以达到治疗的目的,其中对种子细胞进行诱导和快速增殖的刺激因素是研究的重点之一,本实验旨在研究中药生肌液对骨髓基质干细胞(Marrow Stroma Cells,MSCs)功能状态的影响。目的:观察中药生肌液对MSCs增殖、分化和凋亡的影响,筛选有利于MSCs高效增殖、定向成骨分化并能抑制其凋亡状态的相关因素,从而为研制一种来源相对丰富、组织相容性好和成骨能力强的组织工程骨创造条件。方法:1.取成年家兔胫骨骨髓,用密度梯度离心—贴壁筛选的方法,获取MSCs并进行培养和鉴定。2.分别采用水煎法和微波法提取全方生肌液和去当归生肌液,利用细胞形态学观察和MTT检测的方法筛选最佳制备方法和组方生肌液。3.采用不同组方生肌液,利用空白对照、标准对照、阴性对照等比对方法,观察生肌液对MSCs增殖的影响。4.通过形态学观察和检测细胞分泌碱性磷酸酶和骨钙素的方法,比较不同组方生肌液对MSCs成骨活性的影响。5.利用形态学观测、荧光显微分析和流式细胞分析的方法,考察生肌液对MSCs凋亡状态的影响。结果:1.采用密度梯度离心—贴壁筛选的方法,获取家兔骨髓中的MSCs,培养第3天,大部分细胞已经贴壁生长,至第10天时细胞已融合成片,呈指纹状排列,传代后增殖能力旺盛。2.MTT结果显示全方生肌液水煎

全文目录

缩略语表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-11
前言  11-13
主要试剂  13-14
主要实验器材及相关仪器  14-15
第一章：MSCs的获取和培养  15-23
第二章：生肌液的制备  23-30
第三章：生肌液对MSCs增殖的影响  30-37
第四章：生肌液对MSCs成骨活性的影响  37-44
第五章：生肌液对MSCs凋亡的影响  44-62
全文主要结论  62-63
参考文献  63-67
致谢  67-68
附：发表综述《细胞凋亡机制研究进展》  68-71

生肌液对骨髓基质干细胞增殖、成骨活性和凋亡状态影响的研究

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