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EBV相关胃癌细胞凋亡与c-myc和Ki-67异常表达的检测和分析

作　者: 牛爱荣
导　师: 罗兵
学　校: 青岛大学
专　业: 病原生物学
关键词: 胃肿瘤 EB病毒细胞凋亡 c-myc Ki-67 RT-PCR 免疫组织化学增殖期基因
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的检测EBV相关胃癌(EBV associated gastric carcinomas,EBVaGC)、与之匹配的EBV阴性胃癌(EBV negative gastric carcinomas,EBVnGC)以及相应癌旁组织中细胞凋亡和c-myc及Ki-67蛋白的表达,同时检测EBV编码基因的表达,探讨它们在EBVaGCs发生发展中的作用。方法选取13例EBVaGCs、45例与之相匹配的EBVnGCs和58例相应癌旁组织作为研究对象,采用脱氧核苷酸移换酶(TdT)介导的dUTP切口末端标记方法(TUNEL)检测细胞凋亡指数(AI),免疫组化技术检测c-myc及Ki-67蛋白的表达;RT-PCR和Southern杂交技术检测EBV相关基因(核抗原EBNA1和EBNA2编码基因,潜伏膜蛋白LMP1编码基因,早期基因BARF1和BHRF1)的表达。结果①13例EBVaGCs EBNA1 mRNA均为阳性,而EBNA2和LMP1mRNA均为阴性;早期基因中有6例BARF1表达阳性,2例BHRF1表达阳性。②EBVaGC和EBVnGC组织中Ki-67指数(KI)平均值分别为28.254±6.284和37.864±14.523,统计学分析表明:两组间KI平均值差别有显著性(t=3.458,P＜0.01)。③58例胃癌(GC)、16例伴癌前病变癌旁粘膜(MAWPL)、42例不伴癌前病变癌旁粘膜(MAWOPL)组织中Ki-67指数分别为35.716±15.091、31.817±10.332和12.441±10.912,统计学分析结果显示胃癌和MAWPL组织中Ki-67指数明显高于MAWOPL组织,差异有显著性(P＜0.01)。④58例胃癌及癌旁组织中c-myc蛋白的阳性率分别为55.93%(33/58)和36.21%(21/58),两组比较有显著性差异(x~2=5.042,P＜0.05);EBVaGC组和EBVnGC组c-myc阳性率分别为61.54%(8/13)和55.56%(25/45),两组之间无明显差异(x~2=0.147,P＞0.05);58例胃癌组织中c-myc阳性组KI平均值明显高于c-myc阴性组(t=3.364,P＜0.01)。⑤EBVaGC、EBVnGC及EBVaGC癌旁组织中AI分别为0.969±0.413、2.033±0.600和3.254±0.459,统计学分析表明:EBVaGC与EBVnGC细胞凋亡的差别有显著性(t=5.979,P＜0.01),EBVaGC组织和相应癌旁组织的差别亦有显著性(t=13.343,P＜0.01);c-myc阳性组的AI明显低于c-myc阴性组,差异有显著性(t=5.206,P＜0.01)。结论①EBVaGC组织c-myc的表达与EBV感染无明显的相关性,而EBV感染可影响EBVaGC组织中Ki-67的表达。②EBVaGC组织中细胞凋亡指数低于EBVnGC,提示EBV感染可以抑制细胞凋亡,但细胞凋亡发生的机制与Ki-67和c-myc蛋白的表达无明显相关性。③EBVaGC组织中LMP1和EBNA2表达阴性,与c-myc表达和细胞增殖、细胞凋亡的发生无相关性;早期基因BARF1和BHRF1基因可能通过诱导c-myc蛋白表达抑制细胞凋亡等作用促进EBVaGC的发生发展。

EBV相关胃癌细胞凋亡与c-myc和Ki-67异常表达的检测和分析

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