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辛伐他汀对肿瘤坏死因子α及放线菌素D诱导的MG63凋亡的保护作用及可能机制

作　者: 杨丽爱
导　师: 杨云梅
学　校: 浙江大学
专　业: 老年医学
关键词: 肿瘤坏死因子 辛伐他汀 放线菌素D 人成骨样细胞(MG63) 凋亡
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


【目的】：探讨辛伐他汀对肿瘤坏死因子α(TNF-a)及放线菌素D(ActD)诱导的MG63凋亡的影响及可能的作用机制。【方法】：人成骨样细胞(MG63)用DMEM+10%胎牛血清培养,分别用不同浓度的辛伐他汀、TNF-a、TNF-a+ActD作用于MG63,观察对细胞活性的影响,采用合适的浓度诱导细胞损伤,制作凋亡模型,将实验细胞分成5组,对照组,TNF-a+ActD组,另3组采用不同浓度的辛伐他汀(10-7—10-9mol／l)对MG63进行预处理,再加入TNF-a+ActD,用MTs比色法测定各种药物对细胞活性的影响,光镜下观察细胞形态的改变及典型的凋亡小体和细胞碎片,收集凋亡细胞进行蛋白裂解后行western blotting检测细胞凋亡途径。[结果](1)TNF-a单独对MG63作用24小时细胞活性无明显减低。(2)10-7—10-10mol／l浓度的辛伐他汀对MG63作用24小时后细胞活性无明显减低,但高浓度组(10-3—10-5mol／l)。细胞活性明显减低(3)TNF-a对放线茵素D致敏的MG63细胞有明显的细胞毒作用,随着TNF-a浓度的增加,细胞活性明显减低。(4)辛伐他汀可以抑制TNF-a／ActD诱导的人成骨样细胞(MG63)凋亡,经辛伐他汀(10-7—10-9mol／l)预处理后再与TNF-a／ActD作用,细胞活性较未加辛伐他汀有明显增加。在一定浓度范围内呈剂量依赖性,10-7mol／l组细胞活性增加较明显。光镜下观察凋亡小体和致密碎片核有明显减少。(5)辛伐他汀通过激活AKT和抑制NF-KB途径,来抑制TNF-a／ActD诱导的人成骨样细胞(MG63)凋亡。【结论】TNF-a能诱导ActD致敏的MG63细胞发生凋亡,而辛伐他汀则对这种细胞凋亡有明显的拮抗作用,以10-7mol／l作用最明显。辛伐他汀主要是通过激活AKT和抑制NF-KB途径来达到保护作用。

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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