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大蒜素诱导LM-8细胞凋亡及相关基因表达的实验研究

作　者: 周钢
导　师: 杨述华
学　校: 华中科技大学
专　业: 外科学
关键词: 大蒜素细胞凋亡骨肉瘤 LM-8细胞
分类号: R738
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

背景和目的:近年来随着新辅助化疗在临床治疗中的广泛应用,骨肉瘤患者的总体生存率有了很大提高,但仍有部分患者对化疗药物不敏感或耐药,同时大剂量化疗药物容易导致一系列的毒副作用,寻找新的安全有效的化疗药物成为提高化疗效果的途径之一。大蒜素(Allicin)又名大蒜新素,化学名二烯丙基三硫化合物(diallyl trisulfide),是从大蒜球茎中分离出的硫化物,在中国作为药物治疗各种疾病已经有三千多年历史。许多流行病学调查发现居民食用大蒜的量与癌症发病率和死亡率呈显著负相关体外实验研究证实,大蒜素可以通过调节机体免疫功能、细胞周期、凋亡和成血管作用等抑制胃癌等多种上皮来源恶性肿瘤生长,但尚未有关于间叶组织来源如骨肉瘤细胞的报道。本论文就大蒜素对C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞增殖的影响及与Bcl-2、Bax凋亡蛋白表达的关系进行研究,并初步探索其诱导凋亡的机制。方法:用水溶性四唑盐WST-8比色法检测大蒜素对LM-8细胞株生长的影响;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞调亡率的变化;免疫细胞组化技术检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的生长,与大蒜素的浓度和时间有关,在72h其药物半数抑制率浓度是11.09μg/ml;5μg/ml、10μg/ml和15μg/ml浓度的大蒜素作用72小时后可诱导LM-8细胞凋亡(P<0.05);大蒜素可以降低Bcl-2表达,增强Bax表达,经15μg/ml大蒜素作用72h,Bcl-2和Bax灰度值及bcl-2/bax分别为(6.61±1.07)%、(35.72±5.16)%和(0.19±0.03),对照组分别为(23.28±6.17)%、(12.52±2.18)%和1.86±0.48,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:大蒜素可以诱导LM-8细胞凋亡,并且诱导作用呈剂量依赖性,其机制涉及到Bcl-2表达上调及Bax表达下调,有望成为临床防治骨肉瘤的理想药物。

全文目录

中英文名词对照与缩写  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
引言  10-13
  一骨肉瘤化疗的基本概况  10-11
  二中药抗肿瘤的现状  11
  三大蒜素抗肿瘤作用的研究  11-13
大蒜素诱导LM-8 细胞凋亡及相关基因表达的实验研究  13-27
  实验材料和方法  13-18
  实验结果  18-21
  讨论  21-23
  参考文献  23-27
综述骨肉瘤化疗最新进展  27-42
  参考文献  35-42
附录攻读学位期间发表文章情况  42-43
致谢  43

大蒜素诱导LM-8细胞凋亡及相关基因表达的实验研究

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