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洛伐他汀抑制人结肠癌HCT-116细胞生长及其机制的实验研究

作　者: 杨晓领
导　师: 赵宏
学　校: 苏州大学
专　业: 普通外科学
关键词: 洛伐他汀人结肠癌HCT-116细胞凋亡 bcl-2 bax MMP9
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:研究洛伐他汀(Lovastatin)对结肠癌细胞株HCT-116细胞生长抑制和诱导凋亡的作用,并对洛伐他汀对结肠癌HCT-116细胞作用机制进行初步探讨。方法:观察不同浓度洛伐他汀(5μmol/l、10μmol/l、20μmol/l、40μmol/l)对处于对数生长期的HCT-116细胞增殖的影响,并应用MTT比色法检测每孔吸光度值A值,计算对照组和各实验组细胞的生长抑制率。应用流式细胞仪(FCM)研究洛伐他汀对结肠癌HCT-116细胞周期及细胞凋亡作用,计算细胞凋亡率。Western Blot检测MMP9及凋亡因子bcl-2、bax蛋白表达水平的变化。RT-PCR检测不同浓度的洛伐他汀作用于结肠癌HCT-116细胞MMP9在基因水平的变化。结果:(1)MTT法显示lovastatin可明显抑制HCT-116细胞的生长,其效果随着浓度的增加和作用时间的延长而明显增强(P<0.01)。(2)流式细胞术检测出HCT-116细胞经lovastatin作用48小时后可见细胞周期明显抑制,细胞凋亡率与lovastatin浓度呈正相关,且随着浓度的增加HCT-116细胞周期G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例下降,具有统计学意义(P<0.05)。(3)Western Blot法结果显示经不同浓度的洛伐他汀作用于结肠癌HCT-116细胞48小时可使细胞中的bcl-2蛋白、MMP9表达下降,bax蛋白表达升高(P<0.01)。(4)RT-PCR检测表明HCT-116细胞经不同浓度的lovastatin作用48小时后,MMP9的表达呈剂量依赖性降低。结论:Lovastatin可抑制结肠癌HCT-116细胞的生长,且呈时间和剂量依赖性,其机制可能是阻滞细胞周期;下调bcl-2的表达,上调bax表达;诱导细胞凋亡及下调MMP9的表达有关。

全文目录

中文摘要  3-4
Abstract  4-7
前言  7-9
材料与方法  9-18
  一、实验材料  9
  二、主要试剂  9-10
  三、主要仪器设备  10-11
  四、实验方法  11-17
  五、统计学方法  17-18
结果  18-24
  一、LOVASTATIN 对结肠癌HCT-116 细胞生长的影响  18-19
  二、LOVASTATIN 对结肠癌细胞株HCT-116 细胞周期的影响  19
  三、LOVASTATIN 对结肠癌HCT-116 细胞凋亡的影响  19-20
  四、LOVASTATIN 对BCL-2、BAX蛋白及MMP9 表达的影响  20-22
  五、LOVASTATIN 对HCT-116 细胞MMP9MRNA 表达的影响  22-24
讨论  24-29
  一、洛伐他汀抑制结肠癌HCT-116 细胞生长的作用  24-25
  二、洛伐他汀诱导结肠癌HCT-116 细胞凋亡的作用  25-26
  三、洛伐他汀对基质金属蛋白酶的作用  26-29
结论  29-30
参考文献  30-33
综述：他汀类药物抗肿瘤作用及其机制的研究进展  33-44
  1. 他汀类药物抑制肿瘤细胞的增殖  34-36
  2. 他汀类药物对肿瘤凋亡作用的影响及作用机制  36-37
  3. 他汀类药物抑制肿瘤细胞侵袭和转移能力  37-38
  4. 他汀类药物抑制肿瘤血管的形成  38-39
  5. 他汀类药物联合增敏效应  39
  6. 展望  39-41
  参考文献  41-44
中英文对照缩略词表  44-45
攻读学位期间公开发表的论文  45-46
致谢  46-47
详细摘要  47-49

洛伐他汀抑制人结肠癌HCT-116细胞生长及其机制的实验研究

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