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电针对大鼠急性脊髓损伤Caspase-3表达的影响

作　者: 殷先君
导　师: 孙忠人
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 针灸推拿
关键词: 电针 急性脊髓损伤(ASCI) Caspase-3 细胞凋亡
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 85次
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内容摘要


目的:采用大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型,观察电针对ASCI后神经细胞凋亡相关蛋白Caspase-3表达及其变化规律的影响,进一步揭示电针治疗ASCI的作用机制。方法:健康雌性Wistar清洁级大鼠,体重220±10g,共220只大鼠(100只用于免疫组化石蜡切片,100只用于FQ-PCR,20只用于电镜)随机分为4组,每组11只:电针组,造模后给予电针治疗;药物组,造模后给予caspase-3抑制剂治疗;模型对照组,造模后不给予任何治疗;假手术组,只暴露脊髓,不损伤;各组再分为6h、1d、3d、7d、14d时间组,每个时间组5只用于免疫组化检测。所有动物被处死前都进行运动功能的评定,方法参照Basso,Beattie和Bresnahan(BBB)评分标准;HE染色观察脊髓组织形态学变化;免疫组化方法检测脊髓组织Caspase-3表达。数据处理运用SPSS 13.0进行统计学分析。结果:1.电针对ASCI大鼠行为学的影响:电针组治疗后BBB评分,有8例分值增高(72.73%),2例分值降低(18.18%),1例死亡(9.09%);而药物组治疗后BBB评分,有3例分值增高(33.33%),6例死亡(66.67%)。电针对大鼠脊髓损伤后运动功能影响优于药物组,动物死亡的危险性低于药物组。2.电针对ASCI大鼠脊髓病理改变的影响:电针和药物组与模型组相比,各时间点脊髓组织病变明显减轻。6h电针组:神经元形态较好,中央尼氏小体消失、边聚。6h药物组:神经元间隙变小,水肿轻。1d电针组:尼氏体边聚,神经元形态较好。1d药物组:神经元形态较好,中央尼氏小体消失、边聚。3d电针组:中央尼氏小体消失、边聚。3d药物组:神经元数量增多,胶质细胞减少。7d电针组:神经元坏死减少,中央尼氏小体消失、边聚。7d药物组:见神经元修复,胶质细胞增加。14d电针组:尼氏体聚集在核周围。14d药物组:可见神经元坏死少,形态好,胶质细胞数量减少。3.电针组对Caspase-3表达的影响:提示处理因素与时间因素对Caspase-3的检测结果均有影响,相同时间点不同处理组的组间差异体现为:在假手术组阳性细胞有表达。在模型组,伤后6h开始有表达,3d表达较高,7d、14d下降。在3d,药物组表达量低于模型组、模型组高于假手术组(P＜0.05);在14d,电针组表达量低于模型组(P＜0.05)。结论:1.电针能促进ASCI大鼠后肢运动功能的恢复。2.电针能减轻ASCI大鼠受损段脊髓病理形态学的改变。3.电针能明显抑制ASCI大鼠模型损伤段脊髓caspase-3表达,对ASCI有保护作用。

全文目录


缩略语表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-12
文献综述  12-40
  一、祖国医学对SCI的认识  12-20
    1.祖国医学对SCI的定义及分类的认识  12
    2.祖国医学对SCI病因病机的认识  12-14
    3.祖国医学对SCI分证论治的认识  14-15
    4.祖国医学对SCI的治法  15-16
    5.针刺治疗SCI的机理研究  16-20
  二、SCI后的病理生理机制  20-29
    1.SCI的病理变化过程  20-21
    2.继发性损伤的大体变化  21
    3.继发性损伤机制  21-29
  三、SCI的西医治疗  29-40
    1.SCI的手术治疗  29-30
    2.SCI的移植治疗  30-32
    3.SCI的药物治疗  32-37
    4.物理疗法  37-38
    5.基因治疗  38-39
    6.生物材料的应用  39-40
材料与方法  40-46
  一、实验材料  40-41
    1.实验动物  40
    2.主要试剂  40
    3.主要仪器  40-41
    4.实验药物  41
  二、实验方法  41-46
    1.分组方法  41
    2.造模方法  41-42
    3.治疗方法  42
    4.大鼠脊髓损伤后运动功能的评定  42-44
    5.实验取材  44
    6.HE染色观察脊髓组织形态学变化  44
    7.免疫组化方法检测脊髓组织Caspase-3表达  44
    8.统计学处理  44-46
结果  46-49
  一、电针对大鼠脊髓损伤后运动功能影响  46
  二、电针对大鼠脊髓损伤后病理改变的影响  46-47
  三、电针对Caspase-3表达的影响  47-49
讨论  49-56
  一、ASCI模型的选择  49
  二、ASCI功能评价及方法选择  49
  三、ASCI后继发性脊髓损伤  49-50
  四、ASCI后继发性神经细胞凋亡  50-52
  五、Caspase-3和Caspase-3抑制剂在ASCI继发性神经细胞凋亡中的作用  52-53
  六、电针对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3表达的影响  53-54
  七、本实验所存在的不足  54
  八、未来可能的研究方向  54-56
结论  56-57
致谢  57-58
参考文献  58-69
附图  69-73
个人简历  73
发表论文  73

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医临床学 > 针灸学、针灸疗法
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