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TNF-α及IFN-γ在人卵泡液中的检测及其与颗粒细胞凋亡的关系

作　者: 易晓芳
导　师: 王秀霞
学　校: 中国医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: 体外受精-胚胎移植(IVF-ET) 肿瘤坏死因子(TNF-α) 干扰素(IFN-γ) 人卵泡液颗粒细胞细胞凋亡
分类号: R714.8
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的提高接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕患者的妊娠率,一直是人类辅助生殖助孕技术发展的目标,卵丘颗粒细胞对调节卵母细胞发育有重要作用。有学者研究发现,人卵巢颗粒细胞凋亡率越高,卵泡直径越小,卵巢储备功能越差,使得所获卵母细胞质量越差,最终妊娠率越低。因此探索抑制或减缓卵丘颗粒细胞凋亡的影响因素,对于提高IVF-ET患者的妊娠率具有重要意义。研究表明:IVF-ET患者成熟卵泡液中NK细胞活性与妊娠结局密切相关,NK细胞活性高,则临床妊娠率下降。而活化的NK细胞具有分泌TNF-α及IFN-γ功能,并具有促进细胞凋亡的作用,因此有学者探讨了TNF-α及IFN-γ对颗粒细胞的作用,但结论不一。本组实验通过测定接受IVF-ET助孕治疗的患者在取卵日卵泡液中TNF-α及IFN-γ的浓度及卵冠丘复合体颗粒细胞凋亡率,探索TNF-α及IFN-γ细胞因子在人卵泡液中存在的可能性,同时探讨其与颗粒细胞凋亡及IVF妊娠结局的相关性,为改善颗粒细胞作用提供依据。实验方法本实验研究对象纳入标准为:①年龄在35周岁以下,无其它疾病;②近3个月内未应用过激素类药物;③不孕原因为单纯输卵管因素或男性因素;④用标准长方案进行控制性超促排卵。据以上标准,在我院生殖中心2007年6月至2008年1月接受IVF助孕的患者中,共选取57例,按妊娠与否分为两组。计算两组患者的平均年龄、平均不孕时间、平均基础FSH值、平均Gn用量。检测方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人卵泡液中TNF-α及IFN-γ的OD值,通过标准曲线换算成浓度值;通过TUNEL细胞凋亡检测方法观察统计卵丘复合体颗粒细胞的凋亡率。统计分析方法:采用SPSS16.0软件,进行t检验及直线相关分析。实验结果妊娠组卵泡液中IFN-γ浓度为90.66±13.4pg/ml,而未妊娠组为101.14±28.36pg/ml,P=0.08>0.05:妊娠组卵泡液中TNF-α浓度为50.7±5.45pg/ml,而未妊娠组为51.67±3.35 pg/ml,P=0.421>0.05;此外,妊娠组卵丘复合体颗粒细胞凋亡率为0.13±0.06,而未妊娠组为0.175±0.11,P=0.053>0.05。由散点图可见卵泡液中TNF-α浓度与颗粒细胞凋亡率存在相关趋势,相关系数为0.314,考虑正相关,但P=0.07>0.05,无统计学意义。由散点图可见卵泡液中IFN-γ浓度与颗粒细胞凋亡率并不存在相关性,且假设相关,其相关系数为0.029,但P=0.869>0.05,无统计学意义。结论非妊娠组卵丘复合体颗粒细胞凋亡率高于妊娠组,提示卵丘复合体颗粒细胞的凋亡可能与临床妊娠有关,但P=0.053>0.05,无统计学意义;非妊娠组成熟卵泡液中IFN-γ的浓度值高于妊娠组,提示卵泡液中IFN-γ的浓度增高可能不利于妊娠,但P=0.08>0.05,无统计学意义;妊娠组和非妊娠组卵泡液中TNF-α浓度相似P=0.421>0.05;提示卵泡液中TNF-α浓度值的水平与妊娠结局无关;卵泡液中TNF-α浓度与颗粒细胞凋亡率可能存在正相关趋势,P=0.07>0.05;但未发现卵泡液中IFN-γ浓度与颗粒细胞凋亡率存在相关性。

全文目录

一、摘要  4-8
  中文论著摘要  4-6
  英文论著摘要  6-8
二、英文缩略语  8-9
三、论文  9-21
  前言  9-10
  材料与方法  10-12
  实验结果  12-17
  讨论  17-19
  结论  19-21
四、本研究创新性自我评价  21-22
五、参考文献  22-24
六、附录  24-35
  综述  24-33
  在学期间科研成绩  33-34
  致谢  34-35
  个人简介  35

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