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灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏P27表达、细胞凋亡及PI3K/AKT信号传导通路影响

作　者: 李贵梅
导　师: 杨秋萍；刘华；赵川
学　校: 昆明医学院
专　业: 内科学
关键词: 大鼠糖尿病灯盏花素 p27 肾功能肾脏细胞凋亡 Akt
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

第一部分灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏功能、结构及p27表达的影响目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏功能、结构及细胞周期负调节蛋白p27的影响。方法:选健康雄性昆明种SD大鼠85只,随机分为正常对照组（C）25只、糖尿病组（D）和糖尿病灯盏花素干预组（E）各30只。用链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,成模后E组行灯盏花素20mg。kg^-1d^-1腹腔内注射,C组和D组行等量生理盐水腹腔内注射,给药后2w随机抽取C组10只、D组10只、E组12只处死,6w全部处死,收集各组标本检测血糖、血肌酐、尿素氮;肾组织切片观察各组肾小球平均面积（MGPA）和体积（MVG）的变化;免疫组化法检测肾组织p27表达的变化。结果:①灯盏花素组及糖尿病组与正常组相比体重下降;血尿素氮、肌酐比较:糖尿病组＞灯盏花素组＞正常组,灯盏花素组较糖尿病组降低,且肌酐降低以2w组更明显（P＜0.01）。②2w和6w时D、E组肾指数、MGPA、MVG均较C组明显升高,呈糖尿病组＞灯盏花素处理组＞正常组,差异有统计学意义（P＜0.05）。D组6w MGPA、MVG较2w下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。③p27表达的变化:2w和6w均表现为糖尿病组＞灯盏花素处理组＞正常对照组,且6w较2w组更高,（P＜0.05）。结论:糖尿病时肾脏早期细胞肥大,p27蛋白表达明显增加,灯盏花素可改善早期肾脏细胞肥大和p27表达。第二部分灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Akt、p70s6k、4E-BP-1 mRNA表达的影响目的:探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Akt、p70s6k、4E-BP-1mRNA表达的影响。方法:选健康雄性昆明种SD大鼠85只,随机分为正常对照组（C）25只、糖尿病组（D）和糖尿病灯盏花素干预组（E）各30只。链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导建立糖尿病肾病大鼠模型,成模后E组行灯盏花素20mg.kg^-1d^-1腹腔内注射,C组和D组行等量生理盐水腹腔内注射。给药后2w随机抽取C组10只、D组10只、E组12只处死,6w全部处死。原位末端标记法检测肾脏组织细胞凋亡,SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法检测肾脏组织Akt、p70s6k、4E-BP-ⅠmRNA的表达。比较各组间各项指标的差异。结果:①在造模后2W,6w时,糖尿病组及灯盏花素组与正常组比较肾小管凋亡细胞数明显增多,且糖尿病组高于灯盏花素组,2周时肾小球未见凋亡细胞,6周时偶见细胞凋亡;②Akt mRNA:2w及6w均表现为糖尿病组表达升高,2w时糖尿病组＞正常对照组＞灯盏花素处理组,但无统计学差异,6w时灯盏花素处理组＞糖尿病组＞正常对照组,E组显著高于C组P＜0.01,D组高于C组P＜0.05;p70s6k mRNA和4E-BP-I mRNA各组之间无统计学差异。结论:糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡增加、Akt mRNA的表达增加,灯盏花素能够抑制糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡、可改善Akt mRNA的表达。PI3K/Akt信号通路可能参与灯盏花素对糖尿病肾脏细胞凋亡的保护作用。

全文目录

中主要英文缩写  5-6
第一部分摘要  6-8
  摘要  6-7
  Abstract  7-8
第二部分摘要  8-10
  摘要  8-9
  Abstract  9-10
前言  10-13
  参考文献  11-13
第一部分灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏 p27及功能、结构的影响  13-27
  材料与方法  14-17
  结果  17-19
  讨论  19-24
  结论  24
  参考文献  24-27
第二部分灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Akt、P70S6K、4E-BP-1 mRNA表达的影响  27-46
  材料与方法  28-35
  结果  35-36
  讨论  36-42
  结论  42
  参考文献  42-46
综述一细胞周期及其调节蛋白与糖尿病肾病  46-52
  参考文献  49-52
综述二 PI3K/Akt信号通路及其在糖尿病肾病中的研究进展  52-59
  参考文献  56-59
攻读学位期间发表文章情况  59-60
致谢  60

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏P27表达、细胞凋亡及PI3K/AKT信号传导通路影响

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