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14-3-3σ基因表达对小鼠乳腺癌生物学指标影响的研究
作 者: 马玲
导 师: 齐凤杰
学 校: 辽宁医学院
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 14-3-3σ 裸鼠 乳腺癌 MCF-7 凋亡
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
目的应用细胞外源基因转染和免疫缺陷鼠乳腺癌移植模型,探讨活体内14-3-3σ对乳腺癌的抑制作用。方法采用不同浓度的14-3-3σ转染乳腺癌MCF-7细胞,构建裸鼠乳腺癌移植瘤模型。调节浓度为2×10~6,以裸鼠腋下作为注射点,分别皮下注射0.2ml。采用免疫组织化学法和Western bolt技术检测各组瘤组织中CyclinB1、CDK4蛋白的表达,TUNEL法检测裸细胞凋亡情况。结果(1)18只裸鼠皮下移植瘤明显,三组裸鼠成瘤率均为100%,连续四周测量三组裸鼠的成瘤体积,可见高表达组瘤体最小,裸鼠瘤体体积明显小于空白对照组和阴性对照组。结果分别为873.56±19.86mm~3、2405.61±67.44mm~3和2563.27±73.68mm~3,实验组与对照组两两比较裸鼠成瘤体积差异具有统计学意义(P<0.05),空白对照组与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)免疫组化结果显示,CyclinB1蛋白阳性染色呈棕黄色颗粒,阳性信号主要定位在细胞核内。实验组与对照组相比棕黄色颗粒明显减少。蛋白表达量分别为2.62±0.57、8.41±1.49、8.36±1.73,实验组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(P <0.05)。CDK4蛋白阳性染色呈棕黄色颗粒,阳性信号主要定位在细胞质内,实验组与对照组相比棕黄色颗粒明显减少,蛋白表达量分别为2.31±0.63、7.36±1.57、7.28±1.49,实验组与对照组两两比较裸鼠成瘤体积差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)Western blot结果显示,高表达组,阴性对照组和空白对照组的CyclinB1的表达量分别为0.32±0.06,0.88±0.06、0.90±0.05;CDK4的表达量分别为0.28±0.05,0.86±0.08、0.83±0.06,高表达组和对照组两两比较差异具有统计学意义(P<0.05),空白对照组与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)TUNEL检测细胞凋亡情况:检测结果在,高表达组、阴性对照组和空白对照组分别为:0.92±0.52、3.71±0.41、3.56±0.37,实验组组与对照组两两比较均有统计学意义(P<0.05),空白对照组和阴性对照组相比无统计学意义(P>0.05)。结论(1)14-3-3σ高表达可以下调裸鼠乳腺癌组织中CyclinB1,CDK4蛋白的表达。(2)14-3-3σ高表达可以抑制裸鼠乳腺癌细胞凋亡。(3)作为抑癌基因,14-3-3σ基因可以受多种途径控制抑制裸鼠乳腺肿瘤细胞的生长,具体机制有待于进一步研究。
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全文目录
中文论著摘要 4-6 英文论著摘要 6-8 英文缩略语表 8-9 前言 9-11 实验材料与方法 11-20 实验结果 20-24 讨论 24-27 结论 27-28 本研究创新性的自我评价 28-29 参考文献 29-32 附图 32-36 附录 36-49 综述 36-46 参考文献 42-46 在学期间科研成绩 46-47 致谢 47-48 个人简介 48-49
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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