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二苯乙烯苷对LPC诱导血管内皮细胞损伤的保护作用的研究

作　者: 张燕堂
导　师: 王家富；商战平
学　校: 泰山医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 二苯乙烯苷内皮细胞溶血性磷脂酰胆碱非对称性二甲基精氨酸细胞凋亡
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的观察在溶血性磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine,LPC)诱导下,二苯乙烯苷(2,3,5,4′-Tetrahydroxysilbene-2 -O-β-D-glucopyranoside TSG)对血管内皮细胞(Vein Endothelial Cell,VEC)损伤的保护作用,并对其作用机制进行的研究。方法培养人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)株,经传代,于第3-4代用于实验。随机将细胞分为:空白对照;模型组;实验组。首先将LPC以10ug/ml作用于HUVEC,并与细胞一起孵育24小时诱导内皮细胞损伤,建立细胞损伤的模型;将TSG以10.0; 1.0; 0.1μmol/l预先作用于HUVEC 1小时后,再给予10μg/ml的LPC作用于HUVEC共同孵育24小时,建立实验组;同时,设立不加药物的空白对照组。然后,收集细胞上清液测定其丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)含量;收集细胞,测定其中的活性氧(ROS)水平、细胞的凋亡率和存活率。用硝酸还原酶法检测细胞上清液中的NO的浓度;用硫代巴比妥法检测细胞上清液中MDA的含量;生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中ADMA含量;荧光显微镜观察细胞内ROS水平、Annexin V-FITC/PI荧光双染色法流式细胞仪测定其细胞的凋亡率、MTT法检测细胞的存活率。结果1.与空白对照组比较结果显示,用LPC(10μg/ml)作用于HUVEC24小时后,观测到细胞培养上清液中MDA含量(P<0.05),ADMA含量(P<0.05)及细胞内ROS水平(P<0.05)都显著性增加,而细胞培养上清液中NO含量明显降低(P<0.05),细胞的凋亡有所增加(P<0.05),致使细胞的存活率降低(P<0.05)。2.与LPC损伤组比较中,可以看到,以10.0, 1.0, 0.1 umol/1浓度的TSG作用HUVEC 1小时后,再予以终浓度为10μg/ml的LPC作用HUVEC一起孵育24小时后,显示:其均能使细胞培养上清液中MDA含量(P<0.05)、ADMA含量(P<0.05)及细胞内ROS水平(P<0.05)显著性降低,而细胞上清液中的NO含量显著性升高(P<0.05),出现了细胞的凋亡率降低(P<0.05)和细胞的存活率(P<0.05)显著性升高的现象。结论1.二苯乙烯苷能够抑制血管内皮细胞的凋亡,而对LPC诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用。2.二苯乙烯苷对LPC诱导血管内皮细胞损伤的保护作用与其抗氧化、升高NO浓度、降低ADMA水平有关。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
符号说明  8-9
前言  9-12
材料与方法  12-21
结果  21-27
讨论  27-35
结论  35-36
附图  36-39
参考文献  39-45
综述  45-51
  参考文献  48-51
致谢  51-52
攻读学位期间发表的学术论文  52

二苯乙烯苷对LPC诱导血管内皮细胞损伤的保护作用的研究

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