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乙醛诱导的神经细胞毒性机制及虾青素的保护作用
作 者: 闫婷婷
导 师: 赵燕
学 校: 哈尔滨工业大学
专 业: 遗传学
关键词: 乙醛 虾青素 SH-SY5Y 细胞凋亡 氧化应激
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
本课题以人神经母细胞瘤系SH-SY5Y为模型,研究乙醇在体内的重要代谢产物乙醛对神经细胞的损伤作用及其分子机理,以及抗氧化剂虾青素对乙醛诱导的神经毒性的抑制作用。研究发现,当SH-SY5Y细胞以不同浓度乙醛处理24h后,细胞的生存率随着乙醛浓度的升高而下降,而作为凋亡指标的caspase-3蛋白酶活却呈现上升趋势,细胞内发生明显凋亡现象。细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2、Bcl-xl和凋亡促进蛋白Bax的比例Bcl-2/Bax、Bcl-xl/Bax随乙醛浓度上升而下降,细胞通过线粒体凋亡途径引发的凋亡现象越来越明显。作为细胞氧化应激水平指标的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量也随乙醛浓度上升呈现上升趋势,说明细胞内的氧化应激水平逐步增强。虾青素预处理则对乙醛诱导的细胞毒性具有抑制作用,使细胞的生存活性明显上升,caspase-3蛋白酶活显著下降,并抑制乙醛诱导的Bcl-2/Bax、Bcl-xl/Bax下降,并且虾青素预处理明显降低氧化应激水平。因此,乙醛可能通过升高细胞内氧化应激水平、升高凋亡促进蛋白表达及下调凋亡抑制蛋白表达诱导SH-SY5Y细胞凋亡并降低其生存活性。而虾青素则通过降低乙醛诱导的氧化应激和抑制乙醛对凋亡途径关键蛋白表达的影响降低乙醛诱导的细胞凋亡,提高细胞的生存活性。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-8 第1章 绪论 8-20 1.1 课题来源 8 1.2 课题研究背景及国内外研究现状分析 8-19 1.2.1 乙醇及其代谢产物乙醛在人体内的代谢及对人体的损伤 8-13 1.2.2 神经细胞凋亡 13-16 1.2.3 虾青素 16-19 1.3 课题研究的目的和意义 19 1.4 课题研究的主要方法和内容 19-20 1.4.1 课题研究的主要方法 19 1.4.2 课题研究的主要内容 19-20 第2章 实验材料及研究方法 20-28 2.1 引言 20 2.2 研究材料及研究方法 20-28 2.2.1 实验仪器及试剂 20-22 2.2.2 研究对象 22 2.2.3 主要溶液的配制 22 2.2.4 研究方法 22-28 第3章 乙醛对 SH-SY5Y 的毒性作用 28-35 3.1 引言 28 3.2 研究结果与分析 28-32 3.2.1 乙醛浓度梯度实验 28-29 3.2.2 Caspase-3 蛋白酶活力检测 29-30 3.2.3 MDA 检测 30-31 3.2.4 RT-PCR 31-32 3.3 讨论 32-34 3.4 本章小结 34-35 第4章 虾青素对乙醛诱导的细胞凋亡的保护作用 35-42 4.1 引言 35 4.2 研究结果与分析 35-39 4.2.1 乙醛浓度梯度实验 35-36 4.2.2 Caspase-3 蛋白酶活力检测 36-37 4.2.3 MDA 检测 37-38 4.2.4 RT-PCR 38-39 4.3 讨论 39-40 4.4 本章小结 40-42 结论 42-43 参考文献 43-51 攻读学位期间发表的学术论文及其它成果 51-53 致谢 53
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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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