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人涎腺肿瘤的生长、转移及其凋亡的光学成像

作　者: 熊涛
导　师: 骆清铭
学　校: 华中科技大学
专　业: 生物医学工程
关键词: 人涎腺癌整体光学成像 HSV-tk/ACV 绿色荧光蛋白(GFP) 裸鼠荧光共振能量转移细胞凋亡
分类号: R310
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
下　载: 146次
引　用: 2次
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内容摘要

肿瘤如何转移一直以来都是生物医学研究的热点。随着人类肿瘤转移的相关基因陆续被克隆,肿瘤的传统检测方法(免疫组织化学和组织病理切片)已不能快速检测这些基因的活体功能,也不能针对疾病靶标的药物疗效进行有效的评估。近年来,分子成像技术的发展以及小动物模型的广泛应用,使得对活体动物内肿瘤的生长和转移过程进行非侵入性成像成为现实。光学成像方法可在细胞和分子水平对活体内的生理和病理过程进行定性或定量可视化观察。该方法相对于其它分子成像方法而言具有明显的优势:非电离低能量照射、高灵敏度、实时、非侵入性、无需放射试剂以及成像系统费用低。本文采用光学成像技术进行了两方面研究:一方面利用实验室已建立的整体光学成像系统,监测裸鼠体内荧光标记的肿瘤的早期转移、生长以及治疗,同时也检测了裸鼠体内荧光标记的微生物感染及治疗; 另一方面在细胞水平上,采用荧光标记技术同荧光显微镜结合对HSV-tk/ACV系统诱导ACC-M肿瘤细胞的凋亡模型进行了研究。本文主要研究内容如下: 首先采用梭华试剂把pEGFP-C1转染到人涎腺肿瘤细胞,G418筛选出稳定高表达绿色荧光蛋白GFP的人涎腺癌细胞株(ACC-M-GFP),在5只雌性裸鼠上采用颌下腺注射ACC-M-GFP细胞,通过实验室已建立的整体光学成像系统观察到ACC-M-GFP肿瘤细胞转移到肺部、骨骼和膀胱,而在另5只雌性裸鼠上采用尾静脉注射ACC-M-GFP肿瘤细胞,观察到ACC-M-GFP肿瘤细胞可以转移到肺部、肌肉、膀胱及骨骼; 同时将转移组织取出制作了病理切片,结果证明肿瘤细胞发生了转移。因此,这种光学成像技术揭示了ACC-M的多器官转移属性。另外利用筛选的ACC-M-GFP细胞株,建立了GFP标记肿瘤的皮下肿瘤生长治疗模型,并对模型进行了整体荧光成像的初步研究; 同时也进行了表达红色荧光蛋白(DsRed)细菌的腹部感染及抗生素卡那霉素治疗模型的光学成像。实验结果表明光学成像

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
1 绪论  11-43
  1.1 人涎腺癌与实验动物  11-12
  1.2 肿瘤模型与光学成像技术  12-20
  1.3 肿瘤光学分子成像  20-23
  1.4 自杀基因系统在肿瘤治疗中的应用与进展  23-29
  1.5 细胞凋亡及FRET 检测技术  29-40
  1.6 选题背景及本文研究的主要内容  40-43
2 人涎腺肿瘤的实验性肺转移及原位转移模型的活体光学成像  43-61
  2.1 引言  43-44
  2.2 材料与方法  44-53
  2.3 结果  53-58
  2.4 讨论  58-59
  2.5 本章小结  59-61
3 光学成像动态监测肿瘤治疗及抗微生物感染的实时过程  61-69
  3.1 引言  61-62
  3.2 材料与方法  62-64
  3.3 结果  64-66
  3.4 讨论  66-67
  3.5 本章小结  67-69
4 体内外运用HSV-tk  69-77
  4.1 引言  69
  4.2 材料与方法  69-71
  4.3 结果  71-75
  4.4 讨论  75-76
  4.5 本章小结  76-77
5 FRET 检测tk 基因诱导ACC-M 细胞凋亡及其旁观者效应  77-87
  5.1 引言  77-79
  5.2 材料与方法  79-80
  5.3 结果  80-85
  5.4 讨论  85-86
  5.5 本章小结  86-87
6 结论  87-90
  6.1 本文研究的意义  87
  6.2 本文研究的主要内容、结论及创新  87-88
  6.3 展望  88-90
致谢  90-92
参考文献  92-107
附录1 攻读学位期间发表的论文目录  107-108
附录2 本论文所用英文缩写名称一览表  108

人涎腺肿瘤的生长、转移及其凋亡的光学成像

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