学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

RNA干扰技术对前列腺癌细胞系ALVA-41端粒酶活性的抑制作用

作　者: 曾春林
导　师: 高江平；赵亚力
学　校: 中国人民解放军军医进修学院
专　业: 泌尿外科
关键词: 前列腺肿瘤 端粒酶 RNA干扰
分类号: R737.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 44次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的 自从1998年Fire等发现RNAi(RNA interferer)现象以来,短短的几年间人们对它的认识和应用速度是惊人的。RNA干扰是内源性或外源性双链RNA诱发的mRNA水平上的基因沉默机制,具有高度特异性。21nt干扰性小RNA在哺乳动物细胞中可以诱导强有力的特异性RNAi作用,这一突破性研究进展开创了人类疾病治疗的新的研究领域,RNAi技术用于人类疾病治疗已受到极大关注,尤其在AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎等病毒感染性疾病和肿瘤治疗中的应用研究最为活跃,并取得了令人鼓舞的成果。端粒酶在80%～90%的恶性肿瘤中表达,而在大多数正常体细胞不表达,端粒酶是一个通用的人类肿瘤标志。端粒酶在前列腺癌和癌前病变中的高表达,提示端粒酶有可能应用于前列腺癌的诊断,以及端粒酶抑制剂应用于前列腺癌的治疗。本实验探讨DNA载体途径的RNA干扰技术抑制肿瘤细胞端粒酶的作用和机理,为肿瘤的基因治疗寻求新的途径。 方法 (1)针对hTERT小干扰RNA分子生成的质粒载体的构建,经酶切电泳及测序分析进行鉴定;(2)重组RNAi质粒转染至ALVA-41前列腺肿瘤细胞,以TRAP-ELISA方法观察前列腺肿瘤细胞端粒酶活性;(3)通过Western-blot检测前列腺肿瘤细胞端粒酶蛋白的表达水平;(4)用细胞记数法观测重组质粒转染对细胞生长的影响。 结果 (1)成功构建重组质粒mU6-hTERT-siRNA,经酶切电泳及测序分析证实,目的序列成功插入到预计位点。(2)结果显示以1745位置为靶位点的siRNA具有相对较好的抑制作用,端粒酶活性有明显的下降。(3)TRAP-PCR电泳结果显示,经RT-PCR扩增后,以12.5%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,以此电泳结果可进一步确认TRAP-ELISA检测结果。(4)hTERT-siRNA干扰可以影响ALVA-41细胞的增殖,转染Ⅰ-745质粒抑制ALVA-41细胞的增殖。 结论 (1)成功合成重组RNAi质粒mU6-hTERT-siRNA;(2)应用RNA干扰技术可阻止hTERT基因的表达,抑制肿瘤细胞的增殖;(3)应用以端粒酶

全文目录


英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-12
材料与方法  12-22
  实验材料  12
  实验方法  12-22
结果  22-26
讨论  26-30
结论  30-31
参考文献  31-34
综述  34-43
攻读学位期间发表文章  43-44
致谢  44

相似论文

  1. 甜菜夜蛾信息素结合蛋白的表达动态及其受交配和钟基因沉默的影响,S433.4
  2. 棉铃虫NADPH-细胞色素P450还原酶基因的克隆、时空表达及RNA干扰,S435.622.3
  3. 马铃薯甲虫脯氨酸脱氢酶基因的克隆、表达分析及其dsRNA的发酵生产,S435.32
  4. 几种新型杀虫剂对马铃薯甲虫的毒力及两类靶标的分子克隆,S435.32
  5. 慢病毒载体介导的RNAi特异性沉默猪Myostatin基因的研究,S828
  6. MCFP对肝癌细胞生物行为学影响初步研究,R735.7
  7. 灰飞虱功能基因的克隆及其RNAi致死效应,S435.112.3
  8. RNA干扰抑制ERCC1对非小细胞肺癌化疗敏感性的影响（体外实验）,R734.2
  9. 靶向人端粒G-四链体的有机小分子的设计合成和键合作用研究,TQ460.1
  10. 短发夹RNA表达载体对2型单纯疱疹病毒UL54干扰效应的研究,R346
  11. 塞来昔布、丁酸钠对结肠癌HCT-116细胞增殖影响的实验研究,R735.35
  12. RNA干扰抑制EphB4基因表达对胰腺癌PANC-1细胞的影响,R735.9
  13. 靶向Bcl-xl的RNAi对胰腺癌细胞增殖凋亡及对吉西他滨化疗敏感性影响的实验研究,R735.9
  14. 飞蝗几丁质酶基因的功能研究,S433.2
  15. 细胞色素b基因RNA干扰载体的构建及拟南芥的遗传转化,Q943
  16. 干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱移行细胞癌中的表达及对人膀胱癌EJ细胞生物学的影响,R737.14
  17. 3.0T磁共振动脉自旋标记（ASL）技术对前列腺癌的诊断价值,R737.25
  18. RNA干扰靶向沉默STAT1基因对宫颈癌细胞Hela生物学特性的影响,R737.33
  19. mPEG-CS纳米粒介导的livin和survivin双基因干扰对大肠癌细胞杀伤效率的研究,R735.34
  20. STAT2在宫颈癌变阶段的表达及生物学功能初探,R737.33
  21. 异常黑胆质成熟剂总酚与化疗药联合对Hela细胞的影响,R737.33

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 男性生殖器肿瘤 > 前列腺肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com