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STAT2在宫颈癌变阶段的表达及生物学功能初探

作　者: 高丽华
导　师: 黎明
学　校: 中南大学
专　业: 免疫学
关键词: 信号转导和转录活化因子2 宫颈癌变细胞增殖 RNA干扰
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 18次
引　用: 1次
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内容摘要

信号转导及转录活化因子2(Signal transducer and activator of transcription2, STAT2)是STAT家族中一个成员,在天然免疫、抗病毒、细胞增殖等方面发挥重要作用。文献报道：用致瘤剂和促瘤剂共同作用于STAT2基因敲除小鼠,和野生型小鼠相比发现,基因敲除小鼠的肿瘤发生率降低,肿瘤体积减小,死亡率降低,因此认为STAT2是一个促瘤蛋白,在肿瘤发生中起重要作用,但是STAT2在肿瘤的发生发展中的作用仍不清楚。目的：①研究STAT2是否在癌组织或癌细胞系中表达；②研究STAT2的表达是否与宫颈癌变进程相关；是否与宫颈癌的预后相关；③研究STAT2在宫颈癌细胞系HeLa中可能的生物学作用。方法：①采用生物信息学方法研究STAT2在正常组织和肿瘤组织中的表达；②以RT-PCR法在几种肿瘤细胞系中检测STAT2的表达；③以免疫组化法检测从慢性炎症到不典型增生、直至肿瘤发生等各个病变阶段很明显的宫颈组织上皮细胞STAT2的表达,以探讨STAT2表达的阶段性,并分析STAT2的表达与临床参数及预后的相关性；④利用RNA干扰(RNA interruption, RNAi)技术沉默STAT2基因在HeLa细胞系中的内源表达,结合XTT细胞生长实验、软琼脂集落形成实验以及裸鼠体内成瘤实验观察STAT2与肿瘤细胞增殖的关系。结果：①STAT2在多种肿瘤细胞系中表达；②从宫颈上皮内瘤样变早期开始,宫颈上皮细胞表达STAT2,随着病变程度的恶化,STAT2的表达增加；STAT2的表达与宫颈癌的预后不相关；③Hela细胞内源性STAT2表达被干扰后,抑制了细胞体外增殖能力,降低了其在软琼脂中形成集落的能力。裸鼠成瘤实验发现和对照组相比,抑制STAT2表达使细胞在体内形成移植瘤时间延长,移植瘤体积减小,生长速度减慢。结论：①STAT2在多种肿瘤细胞系中高表达。②STAT2的表达与宫颈癌变阶段相关,与宫颈癌的预后不相关,提示STAT2的表达可能是宫颈癌变的早期分子事件；③STAT2的shRNA抑制宫颈癌细胞体内和体外增殖,表明STAT2的shRNA部分抑制宫颈癌细胞的恶性表型,说明STAT2可能与细胞恶性行为相关。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
英文缩写注释  10-11
第一部分 STAT2在宫颈癌中高表达且与病变进程相关  11-24
  1.1 前言  11-13
  1.2. 材料和方法  13-16
    1.2.1 材料  13-14
    1.2.2 方法  14-16
  1.3 结果  16-21
    1.3.1 生物信息学预测分析STAT2在正常组织和肿瘤组织中的表达  16-17
    1.3.2 STAT2在人肿瘤细胞系中的表达  17-18
    1.3.3 STAT2在宫颈癌组织中表达  18
    1.3.4 STAT2的表达与宫颈癌变进程相关  18-20
    1.3.5 STAT2的表达与宫颈癌患者多种临床病理参数及预后无关  20-21
  1.4 讨论  21-23
  1.5 结论  23-24
第二部分 STAT2可能促进宫颈癌细胞增殖  24-35
  2.1 前言  24-25
  2.2 材料与方法  25-30
    2.2.1 材料  25-26
    2.2.2 方法  26-30
  2.3 结果  30-33
    2.3.1 筛选内源干扰STAT2基因的稳定细胞系  30-31
    2.3.2 内源干扰STAT2表达抑制HeLa细胞体外增殖  31
    2.3.3 内源干扰STAT2表达抑制HeLa细胞裸鼠成瘤  31-33
  2.4 讨论  33-34
  2.5 结论  34-35
总结论  35-36
参考文献  36-39
综述  39-47
  参考文献  43-47
致谢  47-49
攻读学位期间主要研究成果目录  49-50

STAT2在宫颈癌变阶段的表达及生物学功能初探

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