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创伤弧菌溶细胞素基因vvhA的表达和其融合蛋白对细胞的毒性作用

作　者: 赵旭鸿
导　师: 陆淼泉；严杰
学　校: 浙江大学
专　业: 病原生物学
关键词: 创伤弧菌溶细胞素孔形成蛋白 vvhA基因 vvhA融合蛋白凋亡
分类号: R378
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

背景和目的创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种有荚膜的革兰阴性嗜盐弧菌,存在于海水及海产品中,由Farmer等于1979年首先报道。该菌具有强烈毒性,主要引起原发性败血症和严重的创口感染。败血症多与生食含菌的牡蛎等贝类海产品有关,尤其好发于肝硬化、血色素沉着症、地中海贫血等体内荷铁量过多的人群中,病死率超过50%。皮肤创口受海水中的创伤弧菌感染,常于24小时内迅速导致严重的组织坏死。创伤弧菌的确切致病机理至今尚未完全明了。溶细胞素是由结构基因vvhA编码的一种相对分子质量为50851的细胞外蛋白质,具有水溶性,由大多数致病菌株产生,能溶解哺乳动物红细胞及中国仓鼠卵巢（CHO）细胞,是创伤弧菌向胞外释放的唯一细胞毒素,一直被认为是创伤弧菌重要的致病因子,且因其具有穿孔特性而颇受关注。目前对创伤弧菌溶细胞素的细胞毒性机制已有广泛研究和报道,但其确切机制尚未完全明了。为了给今后研究探讨创伤弧菌溶细胞素的致病机制以及制备创伤弧菌基因工程疫苗和免疫诊断试剂盒等奠定实验基础,本研究在我们实验室以往工作基础上,用工程菌BL21DE3^{pET-32a（+）-vvhA}表达vvhA融合蛋白,对其进行纯化、复性;通过台盼蓝染料排斥试验检测vvhA融合蛋白对细胞活力的影响;分别以2,

全文目录

一、中文摘要  4-7
二、英文摘要  7-12
三、论文正文  12-53
  前言  12-21
  第一部分融合蛋白的表达、纯化与复性  21-29
  第二部分融合蛋白细胞毒性机制的研究  29-44
  讨论  44-48
  参考文献  48-53
四、综述  53-64
五、致谢  64

创伤弧菌溶细胞素基因vvhA的表达和其融合蛋白对细胞的毒性作用

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