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芹菜素联合热疗法对舌癌Tca8113细胞抗增殖及诱导凋亡的影响

作 者: 沙杰
导 师: 吴豪阳
学 校: 郑州大学
专 业: 口腔临床医学
关键词: 芹菜素 舌癌 免疫组化 凋亡
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 32次
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内容摘要


舌癌是最常见的口腔鳞状细胞癌,其临床表现为生长快,浸润性强,恶性程度高,常发生早期颈淋巴结转移。目前,舌癌的治疗方案是以手术为主的综合序列治疗。但是如果单纯手术治疗并不理想,尚存在局部容易复发、远处转移等难题。因此,对于舌鳞状细胞癌,术后应采用副作用低的化疗药物进行联合治疗,将有助于降低复发率,提高生存率。所以,对于恶性肿瘤术后化疗药物的研究就至关重要了。芹菜素(Apigenin)是一种天然黄酮类化合物,存在于多种水果和蔬菜中,具有低毒、无诱变性及高效等特点。国内外研究证实芹菜素可以抑制多种肿瘤的发生、发展,如消化道肿瘤、泌尿系统肿瘤以及生殖系统肿瘤等。大量实验证明芹菜素在治疗恶性肿瘤方面的作用日益关注。目的:1.研究芹菜素对舌癌Tca8113细胞的生长抑制作用。2.探讨芹菜素诱导肿瘤细胞凋亡、影响细胞增殖的机制。3.研究芹菜素联合热疗方法对肿瘤细胞的影响,为芹菜素应用于治疗舌癌提供理论依据。材料与方法:人工培养Tca8113细胞,配制不同质量浓度的芹菜素作用于该细胞;经过一定时间后,利用倒置显微镜观察Tca8113细胞的生长状态及形态学变化。采用MTT法检测肿瘤细胞的芹菜素对Tca8113细胞的生长抑制作用;采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测凋亡,而细胞周期进程的变化及凋亡率则采用流式细胞仪技术检测,统计学分析应用SPSS13.0软件,采用方差分析,卡方检验,卡方分割等方法检测。取a=0.05为显著性检验水准。结果:1.芹菜素对Tca8113细胞有明显的生长抑制作用:Tca8113细胞在各实验组浓度的芹菜素通过不同时间段作用后,其生长被抑制;且抑制作用的强度,随着芹菜素作用浓度的增高、作用时间的延长而增强。2.倒置显微镜观察:40μmol/L芹菜素处理48h后,细胞体积变小、梭形散在、细胞境界清楚,贴壁能力减弱。3.流式细胞仪检测结果表明,细胞在芹菜素的作用下,G1期比例逐渐增加,S期比例逐渐减少,细胞特异性停滞于G1/S期,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4. Annexin V-FITC/PI染色法通过流式细胞仪检测细胞凋亡率:不同浓度的芹菜素如40μmol/L、80μmol/L作用于Tca8113细胞24h、48h后,细胞凋亡率明显增加,与芹菜素与具有明显的剂量-效应关系和时间-效应关系(即芹菜素浓度越高、作用时间越长,细胞凋亡率越高),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。5.随着温度和浓度的增加(43℃以内),肿瘤细胞的凋亡率也随之增加,差异有统计学意义(P<0.05)结论:1.芹菜素对Tca8113细胞的生长具有抑制作用,其强度与药物浓度和作用时间呈正相关。2.芹菜素对Tca8113细胞的凋亡具有诱导作用,随着时间和剂量的增加,凋亡率也随之增加。3.芹菜素影响Tca8113细胞的周期分布,于G1/S期阻滞细胞周期的进程,这可能也是芹菜素通过该途径影响肿瘤的发生及发展。4.芹菜素联合热疗可协同作用于Tca8113细胞,明显抑制Tca8113细胞增殖。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-10
符号说明  10-11
前言  11-13
材料与方法  13-20
结果  20-28
讨论  28-37
结论  37-38
参考文献  38-44
综述 芹菜素的临床研究进展  44-57
  参考文献  53-57
个人简历  57-58
致谢  58

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