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内皮型一氧化氮合酶基因对心肌梗死大鼠心室重塑的影响
作 者: 秦卫
导 师: 陈鑫
学 校: 南京医科大学
专 业: 外科学
关键词: 心肌梗死 心室重塑 转化生长因子-β1 p38丝裂原活化蛋白激酶 内皮型一氧化氮合酶基因 细胞凋亡 胶原沉积 转化生长因子-β1
分类号: R542.22
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
目的观察大鼠心肌梗死后转化生长因子-β1 的学位论文">转化生长因子-β1(TGF-β1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)以及p-p38MAPK的动态变化,探讨它们在心室重塑过程中的作用。方法结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型并设假手术组为对照,术后1、7、14和21d检测大鼠血流动力学指标;HE染色观察梗死区域组织病理变化;westernblot检测心肌组织TGF-β1、p38MAPK以及p-p38MAPK蛋白的表达水平。结果与假手术组相比,心肌梗死组大鼠心脏功能明显下降;心肌梗死大鼠心肌纤维化程度逐渐增加;心肌组织TGF-β1蛋白表达进行性增加,p38MAPK蛋白表达基本不变,而磷酸化蛋白p-p38MAPK表达则是先上升后下降。结论大鼠心肌梗死后TGF-β1蛋白表达逐渐升高,它的升高可能激活了p38MAPK的磷酸化过程,TGF-β1是大鼠心肌梗死后心室重塑病理生理过程中的重要因子之一。目的研究内皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase,eNOS)基因对心肌梗死大鼠心室重塑的影响。方法结扎雄性SD大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,在心肌梗死周围区注射携带eNOS基因的腺病毒、或者等量的生理盐水、或者不含目的基因的腺病毒载体。3周后检测所有大鼠心功能指标,TUNEL法评价梗死区周围心肌细胞凋亡程度,RT-PCR检测基质金属蛋白酶-2和9(matrixmetalloproteinase,MMP-2、MMP-9)mRNA转录水平,westernblot检测caspase-3、eNOS以及转化生长因子(TGF)-β1的蛋白水平。结果四组大鼠凋亡指数分别为:16.81±0.43、18.25±0.32、18.19±0.21、5.64±0.18,成功转染eNOS基因的心梗大鼠,梗死区周围心肌细胞凋亡程度比前三组低,差异具有统计学意义(P<0.05);四组大鼠心肌MMP-2mRNA灰度比值分别为:0.483±0.068、0.435±0.054、0.488±0.061、0.206±0.039,MMP-9mRNA灰度比值分别为:0.571±0.059、0.552±0.063、0.542±0.048、0.367±0.056,成功转染eNOS基因的心梗大鼠,心肌MMP-2、MMP-9mRNA表达均较前三组降低,差异具有统计学意义(P<0.05);四组大鼠中,成功转染eNOS基因的心梗大鼠心肌eNOS表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而TGF-β1和caspase-3表达水平均下降(P<0.05)。结论心肌转染eNOS基因可以抑制心肌梗死大鼠细胞凋亡,抑制胶原沉积,改善心脏功能,延缓心室重构,对大鼠心肌梗死具有一定的治疗作用。
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全文目录
第一部分 心肌梗死大鼠心室重塑的动态观察 4-22 中文摘要 5-6 英文摘要 6-7 前言 7-8 材料与方法 8-12 1 材料 8 2 方法 8-11 3 统计学处理 11-12 结果 12-17 1 血流动力学测定结果 12-13 2 心肌HHE染色结果 13-16 3 TGF- β1、p38MAPK及p-p38MAPK蛋白表达结果 16-17 讨论 17-19 本研究不足之处 19-20 参考文献 20-22 第二部分 一氧化氮合酶基因对心肌梗死大鼠心室重塑的影响 22-49 中文摘要 23-24 英文摘要 24-26 前言 26-29 1 冠心病与心室重塑 26-27 2 内皮型一氧化氮合酶基因 27 3 腺病毒载体系统 27 4 冠心病与基因治疗 27-28 5 本课题研究思路和拟解决的问题 28-29 材料与方法 29-33 1 材料 29 2 方法 29-32 3 统计学处理 32-33 结果 33-41 1 血流动力学测定结果 33-34 2 梗死周围区心肌细胞凋亡情况 34-36 3 RT-PCR检测各组大鼠MP-2、MP-9mRNA转录水平 36-38 4 WesternBlot法检测caspase-3、TGF- β1、eNOS蛋白的表达结果 38-41 讨论 41-45 1 心肌梗死与心室重塑 41 2 eNOS基因对心室重塑的影响 41-42 3 基因治疗载体的选择 42-43 4 基因导入途径的选择 43 5 eNOS基因影响心室重塑的可能机制 43-44 6 结论与展望 44-45 本研究不足之处 45-46 参考文献 46-49 文献综述 49-62 参考文献 57-62 论文发表情况 62-63 研究生获奖情况 63-64 致谢 64
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管(循环系)疾病 > 心脏疾病 > 心肌疾病 > 心肌梗塞
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