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电离辐射诱导胃癌移植瘤及胃粘膜Fas、iNOS表达与凋亡的实验研究

作　者: 王建平
导　师: 许昌韶
学　校: 苏州大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 电离辐射 胃癌细胞系SGC-7901 鼠粘膜细胞 凋亡 Fas iNOSⅡ
分类号: R73-36
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
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内容摘要


目的：采用TUNEL和免疫组化（ABC）法，观察电离辐射诱导裸鼠胃粘膜组织及原位移植瘤（SGC-7901GCC）细胞凋亡和Fas/iNOS表达的情况，初步探讨细胞Fas/iNOS表达在电离辐射诱导细胞凋亡中的作用。 方法：1．在离体条件下，用6MV.X-线对人胃癌细胞系SGC-7901（SGC-7901GCC）分别单次予以5Gy、10Gy和20Gy照射，应用ANNEXINV—FITC和PI双标法在流式细胞仪（FCM）上检测各剂量组照射后12h、24h、48h的细胞凋亡指数，观察细胞凋亡与辐射剂量及辐射后培养时间之间的关系，为载体动物实验确定理想的辐射剂量和取材时间。 2．将原位种植成功的21只荷瘤裸鼠随机分成3组：A组（未照射组）、B组（照射后24h组）、C组（照射后48h组）。用6MV X-线、D_T20Gy局部照射裸鼠胃体及胃癌组织。照射后按组分别取材制片，用光镜及透射电镜观察胃癌组织和鼠胃粘膜组织的病理变化，采用TUNEL法和免疫组化（ABC）法分别观察两种组织中凋亡指数及Fas表达的情况。 3．应用免疫组化（ABC）法，在计算机细胞图像分析仪上分别检测照射前后移植瘤组织和正常鼠胃粘膜组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达情况。 结果：1．在离体条件下，SGC-7901GCC经5Gy、10Gy、20Gy照射后12h凋亡指数（AI）开始上升，24小时达到峰值，48h回落，照射后峰值AI分别为32.1％、35.7％、49.3％；其中24h组组内20Gy与5GP、10GyAI值比较有显著性差异（p＜0.05）；各时间段照射组的AI值均显著高于未照射组（p＜0.01）。诱导SGC-7901GCC细胞凋亡的理想剂量为20Gy，照射后24h和48h是观察瘤细胞凋亡比较理想的时间。 电离辐豺诱导同癌衫幢＠及日粘腹F－、iNOS tie与瞩亡的实 灾 中文抗羹 2．载体动物实验：A组（未照射组＊B组（照射后24h组LC组）（照射后 48h组儿GC一790llC凋亡指数uI）分别为 14．39％t4．53 ％、28．54 ％土4．54％、16．30％土4．76％，Fas标记指数（LI）分别 为 15．39％土4．43％、30．75％士5．50％、20．06％士3．77％；其中 B 组凋亡指数和Fas标记指数均显著高于A组巾狈．of），各组AI值变 化与LI值变化趋势一致，统计学上具有正相关性。鼠胃粘膜组织AI 分别为 46．32％土6．62％、56．72％土5．84％、41．87％土7．97％，FasLI 分别为47．71％土9．34％、64．34％土9．51％、55．85％土10．38％；其 中除了B组LI值与A组相比有统计学意义切狈．05）外，其余各组 AI值、LI值相比均未见显著性差异。 3．载体动物实验：未照射的移植瘤组织中iNOS表达水平显著低于 照射后24h及48h组b叨．of人照射后24h、48h正常鼠胃粘膜组织 的iNOS表达显著高于未照射组b狈．01），且照射后24h与48h的iNOS 表达水平无显著性差异b川．05人对肿瘤组织而言，照射前后iNOS 表达变化与AI值变化具有正相关性。 结论：1．电离辐射能在体外诱导 r一 790 IGCC细胞凋亡，且具 有剂量依赖性和时程效应。2．电离辐射能在体内诱导SGC—7901GCC 移植瘤细胞凋亡，同时诱导其FaS表达上调；电离辐射诱导的LI与 AI变化具有正相关性，提示电离辐射可能通过诱导Fas表达上调导致 受照细胞凋亡。3．在本实验中，电离辐射未能明显诱导裸鼠胃粘膜组 织的细胞凋亡，但可诱导 Fas表达上调。4．电离辐射能上调 SGCM90 移植瘤及鼠胃粘膜组织的iNOS表达。5．电离辐射诱导的iNOS表达可 能参与了受照移植瘤细胞的凋亡过程。

全文目录


中文摘要  3-5
英文摘要  5-8
前言  8-11
第一部分 离体条件下电离辐射诱导人胃癌细胞系SGC-7901调亡  11-17
  引言  11
  材料与方法  11-12
  结果  12-15
  讨论  15-16
  结论  16-17
第二部分 电离辐射诱导人胃癌移植瘤及鼠胃粘膜Fas表达与凋亡  17-33
  引言  17-21
  材料与方法  21-25
  结果  25-28
  讨论  28-32
  结论  32-33
第三部分 电离辐射诱导iNOS表达在人胃癌移植瘤及粘膜组织凋亡中的作用  33-40
  引言  33-34
  材料与方法  34-36
  结果  36-37
  讨论  37-39
  结论  39-40
参考文献  40-46
附录  46-63
  附图  46-52
  综述Fas/FasL系统与肿瘤研究进展  52-62
  缩略词表  62-63
致谢  63

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 肿瘤学实验研究 > 治疗实验
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