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原代培养人脐静脉内皮细胞电离辐射效应的初步研究

作　者: 王玉祥
导　师: 田野
学　校: 苏州大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 内皮／血管照射细胞周期凋亡内皮素／一氧化氮
分类号: R73-36
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
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内容摘要

目的：初步探讨原代人脐静脉内皮细胞（HUVEC）受照射后在细胞周期分布、细胞凋亡和内皮素（ET）、一氧化氮（NO）分泌等方面的变化，以及照射剂量和照射后时间间隔对它们的影响。方法：来自人胎儿脐带的HUVEC经体外原代培养，使用透射电镜及人第Ⅷ因子抗体免疫组化的方法进行鉴定；用直线加速器的6MV X射线照射0～20Gy，在照射后6、24和48小时，用流式细胞仪（FCM）测定照射后细胞周期的变化，透射电镜及Annexin V-FITC联合PI双染色法在FCM上进行凋亡的定性和定量检测，用放射免疫法和硝酸还原酶法分别测定细胞培养液中内皮素（ET-1）和一氧化氮（NO）代谢产物NO₂^-的含量。结果：按本方法原代培养的HUVEC生长状态良好，在电镜下可见典型的血管内皮细胞（VEC）形态学特征、人第Ⅷ因子抗原免疫组化有阳性表达，证明是人的VEC。FCM检测发现经5、10和20Gy照射后24及48小时出现明显G₀/G₁期细胞的减少和G₂/M期细胞的增加，而2Gy，照射时对细胞周期无影响。0～10Gy照射后48小时，透射电镜的定性和FCM的定量检测中，各照射组与对照组均未发现明显的细胞凋亡，死亡细胞也不明显。0～20Gy照射后24小时内，对照组ET-1含量为1304.47±126.86pg/1x10⁵细胞/ml，5、10和20Gy照射组ET量明显减少，而2Gy照射组ET含量无明显变化；对照组24小时的NO₂^-量为48.39±12.48pg/1x10⁵细胞/ml，各照射组24小时的NO₂^-含量与对照组比较无明显变化。结论：原代培养的HUVEC经的确为人血管内皮细胞，本方法取材方便、重复性好，可用于其它相关实验研究中；生长汇合的HUVEC只有在单次较大剂量（≥5Gy）照射后出现G₂/M期阻滞和ET分泌的减少，原代培养人脐静脉内皮细胞电离辐射效应的初步研究中文摘要而低剂量时则无影响；在 0～10Gy照射后 4 8小时内未引起细胞凋亡与死亡；照射后24小时内皮细胞分泌的NO亦无明显变化。说明原代培养的HUVEC有一定的辐射抗拒性，其机理有待进一步研究。

全文目录

缩略语  3-4
中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
引言  8-10
材料与方法  10-14
结果  14-20
讨论  20-26
结论  26-27
参考文献  27-32
综述  32-39
致谢  39

原代培养人脐静脉内皮细胞电离辐射效应的初步研究

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