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AG490联合顺铂对人宫颈癌HCE1细胞增殖、凋亡的作用

作　者: 郑芮
导　师: 邵淑丽
学　校: 山西医科大学
专　业: 妇产科学
关键词: AG49O 顺铂 HCEI细胞增殖凋亡
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：研究酪氨酸激酶抑制剂AG490联合顺铂对人宫颈癌细胞株HCEI细胞增殖和凋亡的作用。方法：(1)培养人宫颈鳞癌细胞株HCEI,观察细胞生长的情况并摄片。(2)实验分组及实验方法：①终浓度为20umol/L、40umol/L、80umol/L的JAK/STAT通路抑制剂AG490培养HCEI细胞；②终浓度为20ug/ml、40ug/mL、80ug/mL顺铂培养HCEI细胞；③AG490联合顺铂培养HCEI细胞。通过MTT比色法检测培养24小时、48小时、72小时后的细胞增殖活力,并计算细胞生长抑制率,流式细胞仪分别检测24小时、48小时、72小时三个不同时间点的细胞凋亡发生率,并分析细胞周期的改变。(3)各实验中对照组除加入同等浓度的DMSO外,均不加任何干扰因素,统计学方法分析各实验组与对照组之间有无显著性差异。结果：(1)JAK激酶抑制剂AG490处理后细胞数目明显减少,凋亡细胞明显增多,细胞缩小变圆,细胞膜出泡等。(2)经终浓度分别为20umol/L、40umol/L、80umol/L JAK激酶抑制剂AG490处理HCEI细胞24h时,细胞抑制率分别为10.6±0.68%、18.1±1.53%、34.3±1.79%,48h时,细胞抑制率分别为29.1±2.29%、45.3±3.17%、67.0±2.97%,72h时,细胞抑制率分别为40.5±2.83%、66.3±7.04%、82.5±1.77%；经终浓度分别为20ug/mL、40ugm/1、80ug/mL顺铂处理HCEI细胞24h时,细胞抑制率分别为4.6±0.58%、7.5±0.99%、15.1±2.54%,48h时,细胞抑制率分别为7.5±0.48%、10.9±1.37%、21.0±3.07%,72h时,细胞抑制率分别为15.1±3.07%、43.1±3.92%、60.4±4.28%；联合处理组以48小时20umol/LAG490联合20ug/mL顺铂对HCEI细胞的增殖抑制作用为例,细胞增殖抑制率为31.2±3.35%,综上可见AG490和顺铂以时间和剂量依赖性抑制宫颈鳞癌细胞HCEI的增殖,JAK激酶抑制剂AG490联合顺铂对人宫颈癌HCEI细胞的增殖抑制具有协同作用。(3)流式细胞仪细胞周期分析后可见,AG490处理组G1期细胞比例有所增加,S期细胞比例明显降低,顺铂处理组G1期细胞比例明显降低,S期细胞比例明显升高,AG490联合顺铂处理组G期细胞比例和S期细胞比例介于AG490处理组和顺铂处理组之间。以20umol/L AG490作用HCEI细胞48小时为例,G,期细胞比例和S期细胞比例分别为87.1±3.12%、9.9±0.67%,40ug/mL顺铂作用HCEI细胞48小时G1期细胞比例和S期细胞比例分别为3.1±0.27%、93.2±6.25％,20umol/LAG490联合40ug/mL顺铂作用HCEI细胞48小时G,期细胞比例和S期细胞比例分别为14.2±0.79%、81.5±2.47%。(4)细胞凋亡分析表明,AG490处理组细胞凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性特点；顺铂处理组细胞凋亡率较对照组也升高,呈时间和剂量依赖性特点；AG490联合顺铂处理组细胞凋亡率较单药处理组高。结论：1.JAK激酶抑制剂AG490使凋亡细胞明显增多,并以时间和剂量依赖性抑制宫颈癌HCEI细胞的增殖,改变细胞周期的分布、促进细胞凋亡。2.JAK激酶抑制剂AG490与顺铂联合对宫颈癌HCEI细胞的抑制作用明显增强,提示AG490与顺铂联合对宫颈癌HCEI细胞的增殖抑制产生协同作用。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-10
材料与方法  10-14
结果  14-17
讨论  17-20
结论  20-21
参考文献  21-23
附图  23-26
综述  26-36
  参考文献  32-36
个人简介  36-37
致谢  37

AG490联合顺铂对人宫颈癌HCE1细胞增殖、凋亡的作用

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