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低频电磁场对两种不同支架培养的表皮干细胞增殖的影响

作　者: 白文芳
导　师: 张鸣生
学　校: 暨南大学
专　业: 神经病学
关键词: 低频电磁场 表皮干细胞 增殖 胶原海绵支架 壳聚糖支架
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的:探讨低频电磁场(LFEMF)对体外胶原海绵支架和壳聚糖支架培养的人表皮干细胞(hESCs)增殖的影响,为研究LFEMF对ESCs增殖的作用提供一个较好的体外三维环境模型,为皮肤组织工程提供良好的支架材料。方法:将体外分离纯化的hESCs种植于胶原海绵支架和壳聚糖支架行气-液界面培养,外加LFEMF刺激(场强5mT,30min/d),根据频率不同设立1Hz、10Hz、50Hz组和无LFEMF刺激的空白对照组,通过倒置显微镜,HE染色,DAPI核荧光染色及扫描电镜,观察各组支架上hESCs的生长情况,收集培养2d、7d、10d和14d细胞DAPI染色数据,用显微图像软件分析细胞增殖数目,比较各时间点细胞增殖的统计学差异。结果:两种支架上培养的hESCs生长良好,2天后细胞可贴附于支架生长,14d后50Hz组细胞可融合呈片状生长。LFEMF促进hESCs增殖的作用在不同频率组间的差别(F=160.73,P=0.000)和两种支架上培养的hESCs增殖情况的差别(F=71.13,P=0.000)均有统计学意义。培养7d后,LFEMF促增殖效应在两种支架50Hz组开始显现,与其他各组比较有统计学意义(P＜0.05),两种支架空白对照组间细胞数存在差别,有统计学意义(P＜0.05);培养10d和14d后,与空白对照组增殖情况相比,胶原海绵支架各频率组和壳聚糖支架10Hz、50Hz组增殖快,均有统计学意义(P＜0.05),与壳聚糖支架各组hESCs生长情况比较,胶原海绵支架各组细胞增殖快有统计学意义(P＜0.05)。结论:胶原海绵和壳聚糖材料可作为体外培养ESCs的三维支架,其中胶原海绵更适合作为体外培养ESCs的支架材料;LFEMF可促进ESCs增殖,频率不同,效应不一,形成的ESCs-胶原海绵支架复合物可进一步应用于皮肤组织工程的研究,LFEMF在皮肤组织工程中具有较大应用潜力。

全文目录


英文缩写词表  4-5
中文摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
目录  8-9
前言  9-12
第一部分 低频电磁场对胶原海绵支架培养的表皮干细胞增殖的影响  12-28
  引言  12
  1.实验材料  12-14
  2.实验方法  14-19
  3.结果  19-25
  4.讨论  25-27
  5.结论  27-28
第二部分 低频电磁场对两种不同支架培养的表皮干细胞增殖的影响  28-41
  引言  28
  1.实验材料  28-30
  2.实验方法  30-32
  3.结果  32-39
  4.讨论  39-40
  5.结论  40-41
全文结论  41-42
参考文献  42-48
综述  48-57
在读期间完成的论文  57-58
致谢  58

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 一般性问题 > 生物材料学
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