学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
猪瘟病毒E2囊膜糖蛋白B-cell线性化表位的表达及免疫活性研究
作 者: 刘珂
导 师: 黎满香;陈溥言
学 校: 湖南农业大学
专 业: 预防兽医学
关键词: 猪瘟病毒 囊膜糖蛋白E2 线性化B细胞表位 免疫
分类号: S852.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 36次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
本实验利用含猪瘟病毒石门株(CSFV Shimen strain)全基因的质粒为模板,扩增囊膜糖蛋白E2中B/C抗原区和A╱D抗原区的线性化B-Cell表位。扩增了两个单独的基因片段(E2蛋白A╱D区和B/C区基因序列)与一个以上两基因片段融合的基因片段(E2蛋白A/D区连接B/C区基因序列),将扩增的三个片段分别插入原核表达载体pET-32a(+)中,构建成重组表达质粒pTA,pTB和pTC。将构建成功的阳性质粒转化原核表达菌BL21(DE3),对转化重组菌用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行优化,使目的蛋白得到高效表达。应用Ni-NTA亲和层析柱纯化三种重组蛋白,纯化产物经SDS-PAGE电泳鉴定其纯化效果,并用Western-blot检验重组蛋白对猪瘟阳性血清特异的反应原性。在此基础上,将三种纯化的蛋白定量后等体积混合弗氏佐剂免疫猪。经过两次免疫后检测免疫动物的猪瘟特异性抗体消长和免疫相关细胞因子变化情况。结果表明,三种蛋白均可刺激机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答,pTC蛋白的免疫效果明显优于另两种蛋白,并且非常接近商品化细胞疫苗的免疫效果,pTB和pTC刺激机体产生的猪瘟抗体均达到阳性。三种重组蛋白诱导的细胞因子应答符合免疫应答规律。说明三种重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫效果。
|
全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-8 第一章 文献综述 8-22 1 猪瘟的病毒分类、形态结构及理化特性 8-9 2 猪瘟病毒基因组结构及其编码主要蛋白质功能 9-11 3 猪瘟病毒的侵入及复制 11-12 4 猪瘟病毒的编码蛋白及其功能 12-16 5 猪瘟病毒囊膜蛋白E2主要抗原表位研究进展 16-20 6 猪瘟病毒的疫苗研究进展 20-22 第二章 E2蛋白线性化B细胞表位基因的克隆、载体构建和初步表达 22-35 1 材料与方法 22-30 1.1 材料 22-23 1.2 方法 23-30 2 结果与分析 30-32 2.1 E_2线性化表位基因的扩增 30 2.2 重组质粒的酶切分析 30 2.3 重组质粒的初步表达 30-31 2.4 诱导条件的优化 31-32 2.5 Western-blot 32 3 讨论 32-35 第三章 E2蛋白线性化B细胞表位免疫活性的研究 35-42 1 材料与方法 35-36 1.1 材粒 35 1.2 方法 35-36 2 结果与分析 36-37 2.1 实验小猪抗体应答 36-37 2.2 细胞因子水平检测 37 3 讨论 37-42 结论 42-43 参考文献 43-49 主要英文缩略词表 49-50 致谢 50-51 作者简历 51
|
相似论文
- 苹果多酚对γ射线引起的免疫系统损伤防护作用研究,S661.1
- 数字电路内建自测试方法的研究,TN79
- 抗吡虫啉—甲基对硫磷双特异性单克隆抗体的研究,S482.2
- 草鱼呼肠孤病毒vp6和ns38基因的克隆、表达及VP6和NS38免疫原性研究,S941.41
- HSV-2gD模拟抗原表位P6、HBsAg、IL18重组核酸疫苗的构建及免疫效果观察,R392
- 微纤维相关蛋白4在肝纤维化组织中的表达和外周血浓度与肝病理分级的相关性研究,R575.2
- 携带WSSV凡纳滨对虾的养殖和环境因子胁迫的研究,S945
- HCV准种变异特性及其免疫逃逸机制初步研究,R392.1
- 调和玉米油对肉仔鸡抗氧化应激、脂质代谢酶及免疫基因表达的影响,S831.5
- 羊种布鲁氏菌16M优势蛋白抗原的鉴定,S852.61
- 植物精油对仔猪生产性能、肠道微生物及免疫性能的影响,S828.5
- “和美酵素”在断奶仔猪生产中的应用研究,S828.9
- PRRSV的感染差异性和抗体依赖性增强作用研究,S858.28
- 壬基酚与三丁基锡对罗氏沼虾免疫因子、卵黄蛋白原基因表达和性腺发育的影响,S945
- 维生素E和C对军曹鱼(Rachycentron canadum)生长性能和非特异性免疫的影响,S963.1
- 添加钾离子对低盐度水体养殖凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的生长与生理特性的影响,S963
- 几种免疫增强剂对军曹鱼(Rachycentron canadum)生长、非特异免疫力和抗病力的影响,S963
- 免疫磁珠纯化人呼吸道合胞病毒融合蛋白方法的建立,R373
- 棘胸蛙非特异性免疫在多种环境胁迫下的反应特征,Q958.1
- 大豆细菌性斑点病原物的分离鉴定及其两个Ⅲ型效应因子的克隆与功能研究,S435.651
- 转attM基因彩色马蹄莲及AttM解酯酶抗体制备研究,S682.264
中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 兽医基础科学 > 家畜微生物学(兽医病原微生物学) > 家畜病毒学
© 2012 www.xueweilunwen.com
|