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As2O3对体外培养成骨细胞增殖与凋亡和BMP-2基因表达的影响

作　者: 范桂金
导　师: 陈伟
学　校: 遵义医学院
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 三氧化二砷 成骨细胞 增殖 凋亡 BMP-2
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 4次
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内容摘要


目的：观察不同剂量三氧化二砷对体外培养成骨细胞形态特征的影响；检测不同剂量三氧化二砷对成骨细胞增殖与凋亡的影响及其BMP-2基因表达的影响,以期从基因水平上探讨三氧化二砷对成骨细胞的作用机制,为砷的毒理作用和应用药理学的研究提供实验依据。方法：不同浓度（100μmol/L、10μmol/L、1μmol/L、0.1μmol/L)的三氧化二砷作用于体外培养的成骨细胞后,进行如下检测：倒置显微镜观察成骨细胞的形态；MTT法检测成骨细胞的增殖；AnnexinV-FITC双染法和TUNEL法检测成骨细胞的凋亡；RT-PCR检测成骨细胞BMP-2基因的表达情况。结果：①形态学观察显示：100μmol/L组成骨细胞出现核溶解、胞质空泡化现象,无法分辨细胞质和细胞核,10μmol/L组可见部分成骨细胞变圆变小,细胞核固缩、碎裂,细胞膜皱褶、凹陷；1mol/L组成骨细胞数目众多和分裂相明显；0.1μmol/L组成骨细胞间连接紧密。②MTT法结果显示：100μmol/L和10μmol/L组OD值明显低于对照组,且72h OD值低于48h OD值,统计学比较有显著性差异(P<0.01)；1μmol/L组OD值明显高于对照组,且72h OD值高于48h OD值,统计学比较有显著性差异(P<0.01);0.1μmol/L组72h OD值与48h OD值比较无统计学意义(P>0.05),且OD值与对照组比较无统计学意义(P>0.05)、③AnnexinV-FITC/PI双染法和TUNEL法结果均显示：与对照组凋亡率(8.13%、12.12%)比较,10μmol/L组凋亡率(21.6%、18.4%)升高,有显著性差异(P<0.01)；1μmol/L组凋亡率(5.27%、9.35%)下降,有统计学意义(P<0.05)；0.1μmol/L组凋亡率(7.86%、10.26%)无统计学意义(P>0.05)。④RT-PCR结果显示：10μmol/L组72h BMP-2基因表达(0.15±0.03)明显低于48h BMP-2基因表达(0.31±0.11),且BMP-2的表达明显低于对照组(0.86±0.13、0.84±0.08),统计学比较有显著性差异(P<0.01); 1μmol/L组72h BMP-2基因表达(0.84±0.06)与48h BMP-2基因表达(0.81±0.22)比较无统计学意义(P>0.05),且BMP-2基因表达与对照组比较无统计学意义(P>0.05)；0.1μmol/L组72h BMP-2基因表达(4.49±0.19)明显高于48h BMP-2基因表达(1.29±0.14),且BMP-2的表达明显高于对照组,统计学比较有显著性差异(P<0.01)。结论：1.As2O3对体外培养大鼠成骨细胞增殖和凋亡具有双向调节作用；2.As2O3对体外培养大鼠成骨细胞BMP-2基因表达具有双向调控作用；3.As2O3可能通过调控BMP-2基因的表达,影响成骨细胞的增殖和凋亡,从而影响其成骨功能。

全文目录


英汉缩略词对照表  4-6中文摘要  6-8Abstract  8-10前言  10-12材料和方法  12-23结果  23-32讨论  32-38结论  38-40参考文献  40-43附图  43-49综述  49-57  参考文献  53-57致谢  57-58作者简介  58

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
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