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PPARγ激动剂15d-PGJ_2对人甲状腺细胞存活和凋亡的影响

作　者: 王丽莉
导　师: 黄国良；黄培基
学　校: 福建医科大学
专　业: 内科学
关键词: PPARγ 甲状腺刺激抗体 甲状腺细胞 存活 凋亡
分类号: R581.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的:本研究应用甲状腺刺激抗体(TSAb)刺激体外培养的甲状腺细胞,分析过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在TSAb作用下人甲状腺细胞中的表达情况,并初步探讨PPARγ激动剂15-脱氧-△12, 14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对TSAb作用下人甲状腺细胞存活和凋亡的影响。方法:应用原代培养人甲状腺细胞为研究对象,TSAb作用细胞24h后,采用实时定量PCR法和Western- blot法分别检测TSAb组(2mg/mlTSAb阳性血清粗提IgG培养)、TSAb阴性组(2mg/ml正常人血清粗提IgG培养)及对照组(无血清的1640培养基培养)甲状腺细胞中PPARγ的表达情况;不同浓度15d-PGJ2(0、5、10、20、40μmol·L-1)分别干预0、12、24、48h后,应用MTT法检测甲状腺细胞的存活率;干预24h后,利用Hoechst-PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态、Annexin-V-FITC /PI染色流式细胞技术测定细胞凋亡率。同时应用PPARγ拮抗剂GW9662阻断PPARγ途径,观察15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞凋亡的变化。结果:1.PPARγmRNA及其蛋白在TSAb组、TSAb阴性组及对照组甲状腺细胞中均有表达,而在TSAb作用下甲状腺细胞中的表达显著低于TSAb阴性组和对照组(P<0.05)。2.15d-PGJ2呈浓度和时间依赖性抑制TSAb作用下甲状腺细胞的存活,抑制高峰为20μmol·L-115d-PGJ2作用24h;5-40μmol/L 15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞有促进凋亡作用(p<0.05),并呈剂量依赖关系;10μmol/LPPARγ拮抗剂GW9662能拮抗20μmol/L15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡作用(p<0.05)。结论:1.PPARγ在TSAb作用下甲状腺细胞中的表达是显著降低的,作为GD主要致病因子的TSAb,可能通过抑制PPARγ而使细胞增殖增多、凋亡受抑制。2.PPARγ激动剂15d-PGJ2可呈时间与剂量依赖性抑制TSAb作用下的甲状腺细胞存活。3.PPARγ激动剂15d-PGJ2可诱导TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡,并呈一定的剂量依赖性,此效应可能是其抑制细胞存活的机制之一。4.PPARγ激动剂15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡作用能部分被其拮抗剂GW9662阻断。提示其诱导甲状腺细胞凋亡可能主要通过PPARγ途径起作用,具体机制尚待进一步研究。5.PPARγ激动剂可望成为治疗GD的新途径。

全文目录


英文缩略语  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
第一部分 PPARγ在人甲状腺细胞中的表达  11-24
  第一章 材料与方法  11-20
  第二章 结果  20-24
第二部分 PPARγ激动剂15d-PGJ2对人甲状腺细胞存活和凋亡的影响  24-32
  第一章 材料与方法  24-27
  第二章 结果  27-32
第三部分 讨论  32-35
  1 PPARγ 的结构和功能  32
  2 PPARγ 的表达  32-33
  3 PPARγ 激动剂 15d-PGJ2对 TSAb 作用下人甲状腺细胞存活的影响  33
  4 PPARγ 激动剂 15d-PGJ2对 TSAb 作用下人甲状腺细胞凋亡的影响  33-34
  5 总结与展望  34-35
结论  35-36
参考文献  36-40
致谢  40-41
综述  41-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 甲状腺疾病 > 甲状腺机能亢进症
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