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短链脂肪酸盐丁酸钠抑制人结肠癌细胞SW620增殖及其机制的实验研究

作　者: 刘鹏
导　师: 赵宏
学　校: 苏州大学
专　业: 外科学
关键词: 丁酸钠结肠肿瘤 SW620细胞株增殖凋亡 p21WAF1蛋白血管内皮细胞生长因子
分类号: R735.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：研究短链脂肪酸盐丁酸钠对体外培养的人结肠癌细胞SW620增殖抑制的影响,并探讨其作用机制。方法：人结肠癌细胞株SW620用含10%胎牛血清的RPM1640培养基置37℃、5%CO2培养箱培养,实验分为对照组和不同浓度丁酸钠(1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L)处理组,加药物后培养24,48,72小时。MTT比色法测定丁酸钠对SW620细胞生长和抑制率的变化,倒置相差显微镜观察其形态变化,流式细胞仪检测细胞周期分布的变化,并采用RT-PCR检测P21WAF1mRNA和VEGFmRNA的表达变化,Western Blot检测p21WAF1、VEGF蛋白水平的表达变化。结果：1、经丁酸钠处理后,与对照组比较可观察到SW620细胞形态发生明显改变。2、MTT检测法显示,与对照组比较,经不同浓度(1.0mmol/L、2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L)丁酸钠处理后SW620细胞增殖受到抑制,并呈一定的浓度和时间依赖性。3、流式细胞仪检测显示,经2.0mmol/L、4.0mmol/L、10.0mmol/L的丁酸钠处理48小时后,SW620细胞S期比例明显减少,分别从处理前的28.99%降至14.39%、6.54%、5.04%(p<0.05)；而G0/G1期比例则逐渐增加,分别从处理前的51.11%增至65.71%、78.98%、90.40%(p<0.05)。4、经不同浓度的丁酸钠处理24小时后,p21WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显上调,VEGF在mRNA水平和蛋白水平的表达出现下调,与对照组比较有统计学意义(p<0.05)；且随丁酸钠作用浓度增加,p21WAF1上调水平有逐渐增加趋势,相反,VEGF表达水平呈逐渐下调趋势。结论：丁酸钠能有效抑制人结肠癌细胞SW620的增殖,且呈一定的浓度、时间依赖性,其机制与上调p21WAF1在mRNA水平和蛋白水平的表达,使细胞周期阻滞在G0/G1期有关。丁酸钠亦能下调VEGF mRNA和蛋白水平的表达,可能是抑制肿瘤增殖的另一分子机制。

短链脂肪酸盐丁酸钠抑制人结肠癌细胞SW620增殖及其机制的实验研究

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