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PDT诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡和坏死的实验研究

作　者: 李远翰
导　师: 姚宏亮
学　校: 中南大学
专　业: 临床医学
关键词: 光动力疗法纳米化光敏剂细胞凋亡 bcl-2/Bax
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 3次
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内容摘要

研究背景：结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一。随着生活水平的不断提高,结肠癌发病率有逐渐上升的趋势。结肠癌的治疗在目前仍是以手术为主的综合治疗,但手术后患者生活质量较差,复发转移率比较高。因此,寻找行之有效的其他疗法配合甚至取代手术治疗具有重要意义。光动力作用是指在光敏剂参与下,在激光的作用下,使有机体细胞或生物分子发生机能或形态上的变化,严重时可导致细胞损伤和坏死,而且这种作用必须有氧的参与,所以又称光敏化-氧化作用,在化学上称之为光敏化作用,在生物学及医学上则称之为光动力作用,用光动力作用来治病的方法,称为光动力疗法(photodynamic therapy, PDT)。目的：本文旨在研究应用纳米化光敏剂光动力疗法对人结肠癌HT-29细胞凋亡和坏死的影响,并探讨其抗肿瘤机制,以期为临床应用提供参考依据。方法：体外培养人结肠癌HT-29细胞,经纳米化光敏剂介导的PDT处理后对其进行MTT细胞毒性实验,流式细胞仪检测其引起的细胞凋亡与坏死,RT-PCR检测bcl-2和Bax基因mRNA转录的变化。结果：经纳米化光敏剂介导的PDT对人结肠癌HT-29细胞MTT实验发现在2小时的孵育时间,4J/cm2光照剂量,10mg/L光敏剂浓度是其最佳作用参数,流式细胞计数法证实普通光敏剂以导致细胞凋亡为主,而纳米化光敏剂的作用效果较剧烈,可直接导致细胞的坏死。光动力疗法明显下调bcl-2基因的转录,同时上调HT-29细胞中bax转录水平。结论：1.应用纳米化光敏剂进行光动力疗法可诱导人结肠癌HT-29细胞的凋亡,并导致细胞的坏死。2.光动力疗法对人结肠癌HT-29细胞具有明显的诱导凋亡作用,其作用机制可能与下调bcl-2/Bax比例有关。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-8
目录  8-9
缩略词  9-10
第一章前言  10-12
第二章材料与方法  12-22
  2.1 材料和仪器  12-13
  2.2 方法  13-22
第三章结果  22-30
  3.1 MTT细胞毒性实验  22-25
  3.2 流式细胞仪检测纳米化光敏剂介导PDT引起的肿瘤细胞凋亡与坏死  25-26
  3.3 实时荧光定量PCR检测bcl-2、bax基因的mRNA含量变化  26-30
第四章讨论  30-34
第五章结论  34-35
参考文献  35-38
综述  38-51
  参考文献  45-51
致谢  51

PDT诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡和坏死的实验研究

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