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阿司匹林对骨髓瘤细胞（MM1.S）增殖的影响及机制初步探讨

作　者: 刘玉琴
导　师: 陈国安
学　校:
专　业: 内科
关键词: 阿司匹林 骨髓瘤细胞 Caspase-3 Caspase-8 Caspase-9 增殖 凋亡
分类号: R733.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：1.观察阿司匹林对人骨髓瘤细胞株（MM1.S）细胞增殖和凋亡的影响；2.初步探讨阿司匹林对MM1.S细胞抑制增殖与诱导凋亡的作用机制，为阿司匹林临床治疗多发性骨髓瘤提供一定的实验依据。方法：1.通过CCK-8法检测阿司匹林对MM1.S细胞增殖的影响，并在倒置显微镜下观察细胞数量及形态变化；2.流式细胞术检测阿司匹林作用后细胞周期与凋亡的变化。3.酶标仪检测阿司匹林作用后MM1.S细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达。结果：1.阿司匹林在2.5～10mmol/L浓度范围内均可抑制MM1.S细胞的增殖，其抑制作用具有时间和剂量依赖性（P<0.05）。2.在2.5～10mmol/L浓度范围内阿司匹林作用MM1.S细胞24h后，倒置显微镜下发现MM1.S细胞皱缩，细胞膜内出现发泡现象，大小不一，体积变小，数目减少；而对照组细胞生长较旺盛密集，大小均匀一致，胞膜完整。3.在2.5～10mmol/L浓度范围内，与对照组相比，不同浓度ASA（2.5mmol/L、5mmol/L、10mmol/L）作用MM1.S细胞48h后，随着药物浓度增高，G1期细胞逐渐增多，S期细胞减少（P<0.05），而G2期细胞各组无明显变化。4.在2.5～10mmol/L浓度范围内，与对照组比较，不同浓度的ASA（2.5mmol/L、5mmol/L、10mmol/L）作用MM1.S细胞48h后，随药物浓度的增高，细胞早期凋亡率逐渐增加，呈剂量依赖性（P<0.05)。5.在2.5～10mmol/L浓度范围内，不同浓度的ASA（2.5mmol/L、5mmol/L、10mmol/L）作用MM1.S细胞48h后，凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达较对照组明显上升，与对照组相比结果均有统计学意义（P<0.05)。结论：1.在2.5～10mmol/L浓度范围内，阿司匹林可抑制人多发性骨髓瘤细胞增殖，并呈时间和剂量依赖性。2.在2.5～10mmol/L浓度范围内，阿司匹林阻滞MM1.S细胞于G1期，可能为ASA抑制MM1.S细胞增殖的作用机制之一。3.在2.5～10mmol/L浓度范围内，阿司匹林可诱导人骨髓瘤细胞（MM1.S）凋亡，初步机制为激活凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9表达，提示阿斯匹林可通过死亡受体和线粒体两条途径诱导骨髓瘤细胞凋亡。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-9
中英缩略词表  9-11
第1章 引言  11-12
第2章 材料与方法  12-19
  2.1 主要材料与仪器  12-13
    2.1.1 实验细胞  12
    2.1.2 主要试剂  12
    2.1.3 主要仪器  12-13
    2.1.4 主要工作液  13
  2.2 实验方法  13-19
    2.2.1 细胞复苏、传代、培养、计数、冻存  13-14
    2.2.2 CCK-8 法检测阿司匹林作用后细胞增殖情况  14
    2.2.3 倒置显微镜下观察 MM1.S 细胞形态变化  14-15
    2.2.4 FCM 检测细胞周期  15
    2.2.5 FCM 检测细胞凋亡  15-16
    2.2.6 酶标仪检测凋亡相关蛋白 Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 表达  16-18
    2.2.7 统计学分析  18-19
第3章 结果  19-26
  3.1 CCK-8 检测 ASA 对 MM1.S 的抑制增殖作用  19-20
  3.2 倒置显微镜下观察 ASA 作用后 MM1.S 的细胞形态变化  20-21
  3.3 ASA 诱导 MM1.S 细胞周期阻滞  21-22
  3.4 早期凋亡细胞检测  22-24
  3.5 ASA 诱导 MM1.S 细胞凋亡途径分析  24-26
    3.5.1 凋亡相关蛋白 Caspase-3 的表达情况检测结果  24
    3.5.2 凋亡相关蛋白 Caspase-8 的表达情况检测结果  24
    3.5.3 凋亡相关蛋白 Caspase-9 的表达情况检测结果  24-26
第4章 讨论  26-33
  4.1 阿司匹林对 MM1.S 细胞增殖抑制作用  27-29
  4.2 阿司匹林诱导 MM1.S 细胞凋亡  29-31
  4.3 展望  31-33
第5章 结论  33-34
致谢  34-35
参考文献  35-38
攻读学位期间的研究成果  38-39
综述  39-43
  参考文献  42-43

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 骨髓肿瘤
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