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Cyt C和Caspase 3在STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中的表达
作 者: 李云
导 师: 刘菲
学 校:
专 业: 眼科学
关键词: 晶状体上皮细胞 细胞凋亡 Cyt C Caspase 3
分类号: R587.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 5次
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内容摘要
目的:研究Cyt C和Caspase3在STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中的表达,为糖尿病性白内障的发生机制提供新线索。方法:将60只健康雄性SD大鼠进行分组实验,实验组腹腔注射STZ溶液,对照组腹腔注射柠檬酸缓冲液。每4周监测大鼠血糖变化并用裂隙灯观察晶状体的混浊情况,在12周末取大鼠晶状体前囊膜,应用免疫组织化学方法和WesternBlot技术检测Cyt C和Caspase3的表达情况。结果:实验期间各组大鼠血糖水平稳定。裂隙灯观察显示12周末实验组大鼠晶状体出现不同程度的混浊,而对照组大鼠晶状体均透明。免疫组织化学方法发现STZ-糖尿病大鼠LECs中Cyt C和Caspase3表达呈阳性,对照组大鼠LECs中Cyt C和Caspase3表达均阴性。进一步应用Western blot技术分别检测了大鼠LECs胞浆和线粒体中Cyt C含量,实验结果显示实验组胞浆内Cyt C含量大幅度上升,远高于对照组(P<0.05),而实验组线粒体内Cyt C含量则大幅度下降,远低于对照组(P<0.05)。同时,Western blot结果发现STZ-糖尿病大鼠LECs中Caspase3的表达量明显高于对照组(P<O.05)。结论:STZ-糖尿病大鼠LECs中Cyt C由线粒体释放入胞浆且Caspase3表达量增加。高血糖可能通过刺激晶状体上皮细胞释放Cyt C和激活Caspase3,诱导晶状体上皮细胞凋亡,从而形成白内障。
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全文目录
摘要 3-4 ABSTRACT 4-6 目录 6-9 第1章 引言 9-12 第2章 材料与方法 12-22 2.1 材料 12-15 2.1.1 实验动物 12 2.1.2 主要仪器 12-13 2.1.3 试剂 13 2.1.4 自配试剂 13-15 2.2 方法 15-21 2.2.1 实验分组 15-16 2.2.2 动物模型 16 2.2.3 标本留取 16 2.2.4 免疫组织化学方法(IHC) 16-17 2.2.5 Western blot 17-21 2.3 观测指标 21 2.4 统计学分析 21-22 第3章 数据与数据分析 22-29 3.1 血糖监测结果 22-25 3.2 裂隙灯检查结果 25 3.3 免疫组织化学方法 25-26 3.4 Western blot 26-29 3.4.1 不同分组 Cyt C 的表达特点 26-28 3.4.2 不同分组 Caspase 3 的表达特点 28-29 第4章 讨论 29-34 4.1 晶状体的结构和功能 29-30 4.2 STZ-糖尿病性白内障动物模型的建立 30 4.3 晶状体上皮细胞凋亡与白内障 30-31 4.4 细胞凋亡 31-34 4.4.1 细胞凋亡的形态特征 31 4.4.2 细胞凋亡的分子机制 31-34 第5章 结论 34-35 致谢 35-36 参考文献 36-39 攻读学位期间的研究成果 39-40 综述 40-47 参考文献 45-47
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病性昏迷及其他并发症
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