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Cyt C和Caspase 3在STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中的表达

作 者: 李云
导 师: 刘菲
学 校:
专 业: 眼科学
关键词: 晶状体上皮细胞 细胞凋亡 Cyt C Caspase 3
分类号: R587.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 5次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:研究Cyt CCaspase3在STZ-糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中的表达,为糖尿病性白内障的发生机制提供新线索。方法:将60只健康雄性SD大鼠进行分组实验,实验组腹腔注射STZ溶液,对照组腹腔注射柠檬酸缓冲液。每4周监测大鼠血糖变化并用裂隙灯观察晶状体的混浊情况,在12周末取大鼠晶状体前囊膜,应用免疫组织化学方法和WesternBlot技术检测Cyt C和Caspase3的表达情况。结果:实验期间各组大鼠血糖水平稳定。裂隙灯观察显示12周末实验组大鼠晶状体出现不同程度的混浊,而对照组大鼠晶状体均透明。免疫组织化学方法发现STZ-糖尿病大鼠LECs中Cyt C和Caspase3表达呈阳性,对照组大鼠LECs中Cyt C和Caspase3表达均阴性。进一步应用Western blot技术分别检测了大鼠LECs胞浆和线粒体中Cyt C含量,实验结果显示实验组胞浆内Cyt C含量大幅度上升,远高于对照组(P<0.05),而实验组线粒体内Cyt C含量则大幅度下降,远低于对照组(P<0.05)。同时,Western blot结果发现STZ-糖尿病大鼠LECs中Caspase3的表达量明显高于对照组(P<O.05)。结论:STZ-糖尿病大鼠LECs中Cyt C由线粒体释放入胞浆且Caspase3表达量增加。高血糖可能通过刺激晶状体上皮细胞释放Cyt C和激活Caspase3,诱导晶状体上皮细胞凋亡,从而形成白内障。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-6
目录  6-9
第1章 引言  9-12
第2章 材料与方法  12-22
  2.1 材料  12-15
    2.1.1 实验动物  12
    2.1.2 主要仪器  12-13
    2.1.3 试剂  13
    2.1.4 自配试剂  13-15
  2.2 方法  15-21
    2.2.1 实验分组  15-16
    2.2.2 动物模型  16
    2.2.3 标本留取  16
    2.2.4 免疫组织化学方法(IHC)  16-17
    2.2.5 Western blot  17-21
  2.3 观测指标  21
  2.4 统计学分析  21-22
第3章 数据与数据分析  22-29
  3.1 血糖监测结果  22-25
  3.2 裂隙灯检查结果  25
  3.3 免疫组织化学方法  25-26
  3.4 Western blot  26-29
    3.4.1 不同分组 Cyt C 的表达特点  26-28
    3.4.2 不同分组 Caspase 3 的表达特点  28-29
第4章 讨论  29-34
  4.1 晶状体的结构和功能  29-30
  4.2 STZ-糖尿病性白内障动物模型的建立  30
  4.3 晶状体上皮细胞凋亡与白内障  30-31
  4.4 细胞凋亡  31-34
    4.4.1 细胞凋亡的形态特征  31
    4.4.2 细胞凋亡的分子机制  31-34
第5章 结论  34-35
致谢  35-36
参考文献  36-39
攻读学位期间的研究成果  39-40
综述  40-47
  参考文献  45-47

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病性昏迷及其他并发症
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