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db/db小鼠早期视网膜神经变性观察

作　者: 程海霞
导　师: 刘庆淮
学　校: 南京医科大学
专　业: 眼科学
关键词: db/db小鼠糖尿病视网膜病变图形视网膜电图神经节细胞凋亡
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：观察2型自发性糖尿病模型小鼠早期视网膜神经变性情况，为进一步研究糖尿病视网膜病变的发病机制，制定糖尿病视网膜病变的早期干预措施提供一定依据。方法：BKS/DB-/-小鼠及其相同周龄野生型BKS/DB+/+小鼠各20只。在不同周龄（12，16，20，24，28）时每组随机取4只，分别测量体重和随机血糖，经腹腔注射麻醉（10%乌拉坦和5%水合氯醛等量混合，0.15ml/10g体质量）后进行图形视网膜电图(patten-electroretinograrn，PERG)及眼底荧光血管造影检查，然后通过颈椎脱臼法处死小鼠，取出眼球做石蜡切片，HE染色后观察视网膜厚度及视网膜神经节细胞的数目变化，应用TUNEL法检测视网膜神经节细胞凋亡情况。使用SPSS17．0统计软件进行数据统计,实验结果以X±s表示，组间比较采用非配对t检验，显著性差异水平为0.05。结果：我们通过观察发现，和对照组相比，各周龄的db/db小鼠体重明显增加，血糖明显升高，两者均具有统计学差异（n=4），12、16、20、24、28周时两组小鼠体重值经非配对t检验，P值分别为0.0334、0.0022、0.0001、0.0005、0.0014；两组小鼠血糖值经配对t检验，P值分别为0.0001、0.0002、0.0015、0.0001、0.0003。PERG检查结果显示(n=8)：N1波的潜时在12、16、20周时，db/db小鼠和对照组相比，潜伏期稍延长，但是未达到统计学差异（p值分别为0.189、0.3364、0.3064）；N1波的潜时在24和28周时，db/db小鼠和对照组相比，潜伏期延长，且组间达到统计学差异（p值分别为0.016、0.0247）。P波的潜时在12、16、20周时，db/db小鼠和对照组相比，潜伏期稍延长，但是未达到统计学差异（p值分别为0.1161、0.5302、0.0789）；P波的潜时在24和28周时，db/db小鼠和对照组相比，潜伏期延长，且组间达到统计学差异（p值分别为0.0159、0.0277）。P波的振幅在12和16周时db/db小鼠和对照组相比，振幅略有下降，但是未达到统计学差异（p值分别为0.7812、0.2829）；至20周起db/db小鼠P波的振幅和对照组相比明显下降，且组间比较达到统计学差异（20及24周的p值分别为0.0152、0.0114）。小鼠视网膜石蜡切片HE染色显示db/db小鼠视网膜厚度自20周起渐趋变薄，单位面积下视网膜神经节细胞数目减少，而对照组至观察到28周未见明显变化。经TUNEL检测小鼠视网膜石蜡切片发现db/db小鼠在20周时视网膜神经节细胞出现凋亡，每高倍视野最多出现0-1个，24周时最多出现4-5个/高倍视野，28周时凋亡阳性细胞减少，为2-3个/高倍视野；20周、24周、28周视网膜神经节细胞的的凋亡指数分别为：4.35%；14.16%；8.02%，对照组小鼠至28周均未发现明显凋亡。结论：db/db小鼠在未发生可见的糖尿病性视网膜血管性改变之前即存在独立的神经性病变，表现为神经节细胞的凋亡和视觉电生理的改变（振幅降低，潜伏期延长）；在糖尿病早期进行神经保护性治疗可能成为DR早期有效的干预措施。

全文目录

目录  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-10
前言  10-13
材料和方法  13-19
结果  19-27
分析与讨论  27-31
结论  31-32
参考文献  32-37
综述  37-50
  参考文献  46-50
附录  50-51
攻读学位期间发表文章情况  51-52
致谢  52

db/db小鼠早期视网膜神经变性观察

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