学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

野黄芩苷对人舌鳞癌Tca8113细胞survivin和caspase-8表达的影响

作　者: 张颖
导　师: 葛志华; 胡建功
学　校: 承德医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 野黄芩苷 Tca8113细胞凋亡 survivin caspase-8
分类号: R739.86
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 4次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

舌癌是常见的口腔癌，占我国口腔癌发病率的39.95%，居第一位。舌癌大多数为鳞癌，具有生长快，浸润性较强，恶性程度较高等特性，舌癌的淋巴结转移率较高，晚期可发生肺部或其他部位的远处转移。目前舌癌的治疗是以手术治疗为主，辅以放疗和化疗。但术后复发及转移率较高。因此，寻求有效且不良反应小的药物治疗舌癌，对于改善患者的生活质量和提高生存率具有积极意义。野黄芩苷是从植物黄芩的茎、叶中提取的黄酮类化合物，具有抑菌、利尿、抗炎、抗变态及解痉等作用，还具有较强抗癌反应的生理效能[1]。本研究采用野黄芩苷作用于体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞，观察Tca8113细胞的凋亡情况及细胞survivin和caspase-8蛋白表达的改变，探讨野黄芩苷诱导人舌鳞癌细胞凋亡的作用机制，为中药野黄芩苷抗癌作用的研究提供理论依据和实验数据。目的：通过观察野黄芩苷作用后人舌鳞癌细胞的凋亡情况及细胞survivin和caspase-8蛋白表达的改变，探讨野黄芩苷对人舌鳞癌细胞凋亡诱导作用及可能机制。方法：1取购于南京凯基生物科技有限公司的人舌鳞癌Tca8113细胞株进行体外培养用于实验。2实验分组：分为对照组、不同浓度野黄芩苷药物组。对照组用含10%FBS（胎牛血清）的RPMI1640培养液培养舌鳞癌细胞Tca8113；野黄芩苷组根据预实验结果，把野黄芩苷浓度分为80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml三组，分别处理舌鳞癌Tca8113细胞。3采用原位末端转移酶标记技术(Tunel)观察不同浓度野黄芩苷作用人舌鳞癌Tca8113细胞48h后细胞早期凋亡情况。4采用免疫细胞化学法观察不同浓度野黄芩苷作用人舌鳞癌Tca8113细胞48h后survivin和caspase-8蛋白的表达情况。5采用蛋白印迹(Western-blot)技术检测不同浓度野黄芩苷作用人舌鳞癌Tca8113细胞48h后survivin和caspase-8蛋白的表达情况。6数据统计分析：应用SPSS17.0统计学软件，对结果进行单因素方差分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。结果：1采用Tunel检测：80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml野黄芩苷作用于Tca8113细胞48h后，采用Tunel检测，结果显示：对照组中可见零星散落的细胞核呈深棕色或棕黄色的凋亡细胞，其细胞凋亡率为4.45±0.27%。野黄芩苷组随着药物浓度的增高，棕黄色胞核的细胞逐渐增多。其凋亡率分别为17.63±0.25%、36.23±0.36%、51.84±0.58%。经过统计学分析，各组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。（Fig.1～5和Table.1）。2采用免疫细胞化学染色检测：80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml的野黄芩苷作用于Tca8113细胞48h后，采用免疫细胞化学染色。阳性表达是细胞胞浆呈棕黄色。survivin免疫细胞化学染色结果：对照组细胞浆着色很深，呈现清晰的棕黄色。野黄芩苷组随着药物浓度的增高，胞浆棕黄色逐渐减弱。caspase-8免疫细胞化学染色结果：对照组细胞胞浆着色呈现浅黄色，野黄芩苷组随着药物浓度的增高，细胞胞浆棕黄色逐渐增强。经过统计学分析，各组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。（Fig.6～13和Table.2~3）。3采用Western-Blot检测：80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml的野黄芩苷作用于Tca8113细胞48h后，采用Western-Blot检测。结果显示，survivin蛋白的表达：以对照组的表达量最高，随着药物浓度的增高，survivin蛋白的表达依次递减。caspase-8蛋白的表达：以对照组的表达量最低，随着药物浓度的增高，caspase-8蛋白的表达依次递增。此结果与免疫细胞化学的结果一致。经过统计学分析，各组之间的差异均有统计学意义(P <0.05)。（Fig.14a~b、Fig.15a~b和Table.4~5）。结论：野黄芩苷对舌鳞癌Tca8113细胞有抑制生长和促进凋亡的作用，机制可能与野黄芩苷使舌鳞癌细胞survivin蛋白表达的下调和caspase-8蛋白表达的上调有关。

全文目录

中文摘要  6-9
英文摘要  9-12
英文缩写  12-13
前言  13-14
材料与方法  14-25
结果  25-26
附图  26-35
附表  35-38
讨论  38-43
结论  43-44
参考文献  44-47
综述  47-56
  参考文献  53-56
致谢  56-57
个人简历  57

野黄芩苷对人舌鳞癌Tca8113细胞survivin和caspase-8表达的影响

内容摘要

全文目录

相似论文