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巴豆烘制工艺研究

作 者: 黄孟秋
导 师: 赖小平
学 校: 广州中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 巴豆 烘制巴豆 烘制工艺 质量标准 HPLC指纹图谱
分类号: R283.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要


巴豆生品有大毒,临床上一般不直接用药,都用其炮制品,因此巴豆的炮制就显得尤为重要。传统的炮制方法对于现代应用来说显得繁琐复杂,且可控性差,用药安全得不到保障。因此,本课题拟定以烘制法来替代传统的炮制方法,并对其作考察。本研究意图通过合理的试验设计,优选出巴豆的最佳烘制工艺,并对该工艺进行验证试验研究,从而得到一批稳定的巴豆烘制品并为其建立一套质量标准。为了进一步深入地探究巴豆在烘制前后整体化学成分的变化与否,本研究将对巴豆炮制前后脂肪油部分和非脂肪油部分进行指纹图谱分析,通过全面的分析来揭示炮制前后巴豆中化学成分所发生的变化,由此对巴豆烘制工艺研究作补充和说明。在完成了化学成分变化的分析之后,将对生品与炮制品的药效与毒性的差异进行研究。弄清其炮制目的、炮制前后的化学成分的质与量的变化、药效与毒性的差异性等,对揭示巴豆的炮制原理,以及完善巴豆炮制工艺、临床用药的合理性及其炮制品质量标准化的研究,均具有重要的参考意义。本文的研究方法及结果如下:(1)确立巴豆的最佳烘制工艺:以巴豆中的有效成分巴豆苷、巴豆油和有毒成分巴豆毒蛋白的含量作为监控指标,设立不同温度,不同厚度和不同烘制时间进行考察,确定最佳烘制工艺为烘制温度180℃,铺放厚度3cm,烘制时间90min。对该工艺进行放大验证,证明该工艺合理、可行。(2)建立烘制巴豆的质量标准:本研究完成了烘制巴豆质量标准及烘制巴豆质量标准的起草说明,包括了来源,性状,显微鉴别与薄层鉴别,水分、总灰分检查,巴豆苷、巴豆油及巴豆毒蛋白的含量测定、性味与归经、功能与主治、用法与用量、贮藏等等。(3)烘制前后化学成分差异变化的对比研究:利用GC-MS分析方法,对烘制前后的巴豆脂肪油部分化学成分上的差异作分析,结果发现,巴豆脂肪油中可检出共12种高级脂肪酸,其相对含量并未因烘制而出现明显差异。采用HPLC指纹图谱分析的方法,对烘制前后的巴豆非脂肪油部分以巴豆苷作为参照物峰,标定了12个共有峰,并建立了10批生巴豆与烘制巴豆的指纹图谱,相似度均在0.9-1.0之间,且可发现经烘制后,2号木兰花碱、5号、6号、7号、9号、12号的峰面积均减小,预示巴豆烘制品中上述成分可能会减少,且烘制品中还多了一个物质x,提示烘制对巴豆的非脂肪油部分的整体化学成分均有一定影响。(4)烘制前后药效与毒性作用的对比研究:通过体外抗菌试验可得知,在经过烘制过后,巴豆的抗肺结核分枝杆菌的药效作用并没有降低,在相同稀释度的前提下,培养基上均未出现菌落,可见加热的过程并没有使其抗菌作用发生改变。急性毒性试验结果表明,生巴豆的LD50为888mg/kg、而烘制巴豆的LD50为2139mg/kg,证明经烘制过后,巴豆的毒性作用显著降低了,而胃肠推进试验结果表明,生巴豆及烘制后的巴豆都有促进胃肠运动功能,同剂量相比,烘制巴豆的促胃肠推进作用要弱于生巴豆,表明经过烘制后,巴豆的泻下作用有所减缓,药性更为缓和,验证了其“遇火则良”的特点,证明了烘制工艺的可行性。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-8
目录  8-10
引言  10-12
第一部分 文献研究  12-22
  1 药材概况  12-13
  2 化学成分研究概述  13-14
  3 药理作用研究概述  14-16
  4 巴豆炮制研究概述  16-19
  5 烘制法研究概述  19-21
  6 小结  21-22
第二部分 实验研究  22-74
  第1章 巴豆烘制工艺探索  22-32
    第1节 巴豆烘制工艺研究  22-30
      1 仪器和试药  22-23
      2 方法与结果  23-29
        2.1 巴豆苷含量测定方法的建立  23-24
        2.2 蛋白质含量测定方法的建立  24-26
        2.3 影响烘制的各因素考察  26-29
      3 小结  29-30
    第2节 巴豆烘制工艺验证试验  30-32
      1 仪器和试药  30
      2 方法与结果  30-31
        2.1 烘制品的制备  30-31
        2.2 验证试验样品中各有效成分的含量测定结果  31
      3 结论与讨论  31-32
  第2章 烘制巴豆质量标准研究  32-43
    第1节 烘制巴豆质量标准  32-34
    第2节 烘制巴豆质量标准起草说明  34-43
      1 饮片名称  34
      2 药材来源  34
      3 性状  34
      4 鉴别  34-36
      5 检查  36-37
      6 含量测定  37-41
      7 性味归经  41
      8 功能主治  41
      9 用法用量  41-42
      10 贮藏  42-43
  第3章 烘制前后化学成分差异变化的对比研究  43-69
    第1节 巴豆烘制前后脂肪油成分的GC-MS分析  43-46
      1 仪器和试药  43
      2 方法与结果  43-45
        2.1 烘制品的制备  43-44
        2.2 脂肪油的提取与样品的制备  44
        2.3 GC-MS色谱/质谱条件  44
        2.4 化学成分分析  44-45
      3 结论与讨论  45-46
    第2节 巴豆烘制前后非脂肪油部分HPLC指纹图谱对比研究  46-69
      1 仪器及试药  46-47
      2 方法与结果  47-66
        2.1 供试品溶液制备方法研究  47-50
        2.2 参照物的选择与制备  50
        2.3 检测方法  50-55
        2.4 方法学验证  55-61
        2.5 巴豆生品、巴豆烘制品非脂肪油部分指纹图谱测定结果及共有模式  61-64
        2.6 巴豆生品、巴豆烘制品非脂肪油部分指纹图谱相似度评价  64-65
        2.7 巴豆生品、巴豆烘制品非脂肪油部分指纹图谱对照图谱的比较  65-66
      3 结论  66-67
      4 讨论  67-69
  第4章 巴豆烘制前后药效作用与毒性作用的对比研究  69-74
    1 实验材料  69-70
    2 实验方法和结果  70-72
      2.1 体外抗结核杆菌实验  70-71
      2.2 急性毒性试验  71-72
      2.3 胃肠推进作用试验  72
    3 小结与讨论  72-74
第三部分 结语  74-77
  一、小结与讨论  74-75
  二、创新性  75-76
  三、展望  76-77
参考文献  77-80
硕士研究生在读期间参与课题  80-81
硕士研究生在读期间发表的论文  81-82
致谢  82

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药炮制、制剂 > 炮制方法
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