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羌活和独活药材色谱指纹图谱研究

作　者: 金海燕
导　师: 毕开顺；陈晓辉
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 中药分析学
关键词: 羌活独活 GC指纹图谱 HPLC指纹图谱质量控制
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

羌活为伞形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H．T．Chang或宽叶羌活Notopterygium forbesii Boiss．的干燥根茎及根，独活为伞形科植物重齿毛当归Angelicapubescens Maxim．f．biserrata Shan et Yuan的干燥根，两者作为常用中药收载于《中国药典》2005年版（一部）。由于两者来源相近、功效相似、外观性状差异不大，致使商品市场和临床用药中极易混淆。本研究收集了17个不同产地的羌活和独活药材，通过所含挥发油量的差异和GC、HPLC指纹图谱方法对两者进行了比较，对羌活和独活药材的鉴别和质量控制进行了系统的研究。挥发油和香豆素类成分为羌活和独活的主要药效成分。本研究测定了17批不同产地羌活和独活药材中挥发油的量。然后采用GC-FID法建立了两者挥发油的指纹图谱，使用DB-1毛细管气相色谱柱（30 m×0．25 mm×0．25μm），采用程序升温，在65min内，柱温从50℃以8℃·min^-1升至85℃（保持12 min），以4℃·min^-1升至155℃（保持18 min），再以12℃·min^-1升至250℃（保持5 min），检测器温度为270℃。对17批羌活和独活药材挥发油进行指纹图谱分析，结果表明两者具有较大差异。将羌活GC指纹图谱所得数据进行聚类分析，以夹角余弦（Cosine）作为样品相似性测度。17批羌活分为3类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ类为非推荐品（包括劣品和伪品），选取Ⅰ类的15批药材建立共有模式，采用药典委员会推荐的色谱指纹图谱处理软件，计算样品与共有模式之间的相似度，0．85以上者为羌活推荐药材；同法17批独活分为4类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类为非推荐品，选取Ⅰ类的11批药材建立共有模式并计算相似度，0．85以上者为独活推荐药材。将羌活样品GC指纹图谱代入独活GC共有模式计算相似度，最高者只有0．39；将独活样品GC指纹图谱代入羌活GC共有模式计算相似度，最高者也只有0．52。结果表明GC指纹图谱方法可以准确地鉴别羌活与独活药材，同时，通过两者挥发油量的差异可进一步对两者进行鉴别。本研究建立了羌活与独活的HPLC指纹图谱方法，采用Diamonsil C₁₈柱（250 mm×4．6 mm，5μm），流动相为甲醇：乙腈（1：1）（A）-0．03％磷酸水溶液（B），梯度洗脱程序为：0～30 min，20％～46％A；30～46 min，46％～48％A；46～48 min，48％～72％A；48～60 min，72％A；60～62min，72％～95％A；62～70 min，95％A，检测波长320 nm。对17批羌活和独活药材进行指纹图谱分析，结果表明两者具有显著差异。将羌活HPLC指纹图谱所得数据进行聚类分析，17批羌活分为3类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ类为非推荐品，选取Ⅰ类的8批药材建立共有模式并计算相似度，0．85以上者为羌活推荐药材；17批独活分为5类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ类为非推荐品，选取Ⅰ类的13批药材建立共有模式并计算相似度，0．85以上者为独活推荐药材。将羌活样品HPLC指纹图谱代入独活HPLC共有模式计算相似度，最高者只有0．22；将独活样品HPLC指纹图谱代入羌活HPLC共有模式计算相似度，最高者只有0．11。结果表明HPLC指纹图谱方法可以准确地鉴别羌活与独活药材。本研究将GC和HPLC指纹图谱方法相结合，共同对收集的羌活和独活药材进行质量评价，并对两者进行比较和鉴别，方法简便快速、科学可靠，为两者在临床应用中的区分和质量控制提供了依据。

全文目录

摘要  10-12
ABSTRACT  12-15
第一章前言  15-20
  1.1 中药指纹图谱与中药质量控制  15-16
  1.2 羌活和独活的研究概况  16-18
  1.3 立体依据与研究思路  18-20
第二章羌活和独活药材GC指纹图谱研究  20-41
  2.1 羌活和独活药材挥发油量的测定  20-22
    2.1.1 药材收集  20
    2.1.2 挥发油提取条件考察  20-21
    2.1.3 挥发油量的测定  21-22
  2.2 羌活和独活GC指纹图谱  22-37
    2.2.1 色谱条件  22
    2.2.2 色谱条件的选择  22-23
    2.2.3 溶液的制备  23
    2.2.4 方法学验证  23-31
    2.2.5 GC指纹图谱的建立  31-36
    2.2.6 GC指纹图谱质量评价方法的确立  36-37
  2.3 羌活和独活药材GC指纹图谱区别  37-40
  2.4 小结  40-41
第三章羌活和独活药材HPLC指纹图谱  41-62
  3.1 药材收集与预处理  41
  3.2 色谱条件  41-42
  3.3 色谱条件的选择  42
  3.4 溶液的制备  42
  3.5 方法学验证  42-51
  3.6 HPLC指纹图谱的建立  51-57
  3.7 HPLC指纹图谱质量评价方法的确立  57-58
  3.8 羌活和独活药材HPLC指纹图谱区别  58-61
  3.9 小结  61-62
第四章结果与讨论  62-64
参考文献  64-67
附录  67-93
致谢  93-94
个人简历  94

羌活和独活药材色谱指纹图谱研究

内容摘要

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