学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
核孔蛋白和蛋白乙酰化
作 者: 刘红利
导 师: 陈燕
学 校: 华中科技大学
专 业: 内科学血液
关键词: 鱼藤素 Burkitt淋巴瘤 Cyclin D1 pRb 凋亡 U937 核孔蛋白 Nup98 Nup88 姜黄素
分类号: R733
类 型: 博士论文
年 份: 2006年
下 载: 122次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
|
第一部分鱼藤素对Burkitt淋巴瘤细胞周期及细胞周期蛋白的调节作用目的：研究鱼藤素对人类Burkitt淋巴瘤Raji和Daudi细胞系体外抗肿瘤作用，对比研究其对正常人外周血单个核细胞的细胞毒性，探讨其抗癌作用的分子机理。方法：采用MTT法检测细胞增殖活性，Hoechst 33258染色和Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡，流式细胞仪检测细胞周期分布，Western blot检测鱼藤素对Daudi细胞Cyclin D1及pRb蛋白表达的影响。结果：（1）鱼藤素对Raji和Daudi细胞具有明显的增殖抑制作用，而对正常人外周血单个核细胞细胞增殖抑制作用不明显。（2）鱼藤素可以诱导Raji和Daudi细胞凋亡，Hoechst 33258染色可见Raji细胞产生典型凋亡细胞特征。Annexin V-PI双标法显示鱼藤素以剂量依赖式诱导Daudi细胞早期凋亡。（3）鱼藤素作用Daudi细胞周期发生变化，0、10、20和40nmol/L鱼藤素作用Daudi细胞24h，使细胞周期聚积于G1/G0期，G1/G0期比例从37.34％逐渐增加至56.56％，呈剂量依赖式逐渐增加；相反S期呈剂量依赖式逐渐降低，其比例从37.72％逐渐降低至21.36％。而对G2/M期细胞作用不明显。鱼藤素作用Raji细胞周期发生变化，主要使细胞周期聚积于G2/M期，0、10、20和40nmol/L鱼藤素作用Raji细胞24h，G2/M期细胞比例从13.04％增加至54.7％。（4）鱼藤素对正常人外周血单个核细胞无明显抑制增殖作用。（5）鱼藤素以剂量依赖式使Cyclin D1及pRb蛋白表达降低。结论：鱼藤素能够抑制Raji和Daudi细胞增殖，并诱导细胞凋亡，使Daudi细胞阻滞于G1/G0期而使Raji细胞阻滞于G2/M期，鱼藤素对正常人外周血单个核细胞无明显细胞毒作用，而选择性作用于肿瘤细胞。其对抗肿瘤机制可能通过下调Cyclin D1和pRb蛋白表达有关。第二部分鱼藤素对U937细胞周期及核孔蛋白Nup98和Nup88调控作用目的：研究鱼藤素对人类单个核白血病细胞株U937细胞系体外抗肿瘤作用，研究其引起细胞周期与核孔蛋白Nup98和Nup88的改变，探讨其抗癌作用的分子机理。方法：采用MTT法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞周期分布，激光共聚焦显微镜检测Nup98和Nup88蛋白表达变化，免疫电镜和流式细胞仪观测鱼藤素对Nup98和Nup88的调控，Western blot检测鱼藤素对U937细胞Nup98和Nup88蛋白表达的影响。结果：（1）鱼藤素对U937细胞具有明显的增殖抑制作用，其抑制作用呈时间与剂量依赖式。（2）鱼藤素可以诱导U937细胞凋亡，Hoechst 33258染色可见典型凋亡细胞特征。（3）鱼藤素作用U937后细胞周期发生变化，0、5、10、20、40nmol/L鱼藤素处理U937细胞24h，主要使细胞阻滞于S期和G2/M期，而G1/G0期细胞呈浓度依赖式降低。G1/G0期细胞比例依次为73.01％，71.15％，68.42％，52.45％，43.99％和22.82％，S期细胞比例依次为17.18％，16.3％，18.09％，27.56％，31.21％和46.85％，G2/M期细胞比例依次为9.75％，12.31％，13.09％，18.99％，24.83％和27.79％。（4）鱼藤素可以调节U937细胞Nup98和Nup88的表达，低浓度（nmol水平）即可使Nup98表达下调，而使Nup88表达上调，这为鱼藤素抗肿瘤机理的研究提供了重要的理论依据。结论：鱼藤素能够抑制U937细胞增殖，使细胞阻滞于S期和G2/M期，而G1/G0期细胞呈浓度依赖式降低，并诱导细胞凋亡。其抗肿瘤机制可能通过参与调控U937细胞Nup98和Nup88的表达，使Nup98表达下调，而使Nup88表达上调有关。第三部分姜黄素作为新型的组蛋白去乙酰化酶抑制调控B细胞系淋巴瘤的增殖作用目的：了解姜黄素对B细胞系淋巴瘤细胞系Raji细胞组蛋白去乙酰化酶（HDAC1，HDAC3，HDAC8）和乙酰化的组蛋白H4（Ac-Histone H4）的影响，探讨其对抑制淋巴瘤细胞增殖的分子机制。方法：采用四唑盐（MTT）比色检测检测Raji细胞增殖，免疫印迹（Western blot）检测Raji细胞HDAC1，HDAC3，HDAC8和Ac-Histone H4的影响，运用免疫组织细胞化学观察Raji细胞HDAC1，HDAC3，HDAC8和Ac-Histone H4的蛋白的表达。结果：（1）姜黄素对Raji细胞可明显增殖抑制作用。（2）25μmol/L姜黄素作用Raji细胞24h，免疫组织细胞化学结果显示HDAC1，HDAC3，HDAC8的吸光度与未处理组相比较，明显下降（p＜0.05）；（3）25μmol/L姜黄素作用Raji细胞24h，免疫组织细胞化学结果显示Ac-Histone H4的吸光度与未作用组相比较，明显增加（p＜0.05）；（4）6.25，12.5和25μmol/L姜黄素处理Raji细胞24h，免疫印迹检测显示HDAC1和HDAC3和HDAC8蛋白表达降低（p＜0.05）。（5）6.25，12.5，25μmol/L姜黄素作用Raji细胞24h，免疫印迹检测显示Ac-Histone H4表达增加。结论：姜黄素通过抑制第一类HDACs的表达和上调组蛋白乙酰化水平，实现对肿瘤细胞的抗增殖作用，其作为一种新型的组蛋白去乙酰化酶抑制剂对B细胞淋巴瘤细胞株Raji细胞具有抗肿瘤作用。
|
全文目录
一 英文缩略词简表 5-7
二 摘要 7-14
中文摘要 7-10
英文摘要 10-14
三 正文 14-76
前言 14-21
靶点之一:鱼藤素急性白血病细胞核孔蛋白调控抗肿瘤的机制研究 14-15
靶点之二:姜黄素作为组蛋白去乙酞化酶抑制剂对淋巴瘤作用的体外研究 15-21
第一部分 鱼藤素对Daudi细胞周期及细胞周期蛋白的调控作用 21-48
材料与方法 21-35
结果 35-44
讨论 44-46
参考文献 46-48
第二部分 鱼藤素对U937细胞周期及核孔蛋白Nup98和Nup88调控作用 48-64
材料与方法 48-53
结果 53-58
讨论 58-61
参考文献 61-64
第三部分 姜黄素作为新型的组蛋白去乙酰化酶抑制调控B细胞系淋巴瘤的增殖作用 64-76
材料和方法 64-66
结果 66-72
讨论 72-74
参考文献 74-76
四 综述 76-92
组蛋白乙酰化/去乙酰化及其在恶性血液病中的研究进展 76-85
1 组蛋白乙酰化/去乙酰化与基因转录 76-77
2 HATs和HDACs 77-79
3 组蛋白乙酰化/去乙酰化紊乱与恶性血液病的发病机制 79-82
4 DASI的前景展望及结语 82
参考文献 82-85
P27/kip1及其在恶性血液病中的研究 85-92
1 p27/Kip1的结构 85
2 p27/kip1与细胞周期的关系 85-87
3 p27/kip1与恶性血液病 87-89
参考文献 89-92
五 附录 92-124
六 致谢 124
|
相似论文
- 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
- 磷酸化介导的UGT1A3代谢活性差异的初步研究,R346
- CADPE抗肿瘤作用及对胃癌细胞凋亡的影响,R735.2
- 塞来昔布与β-榄香烯联合给药的抗肿瘤作用及其机制研究,R96
- TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
- 醋酸铅对鲤鱼卵巢上皮细胞毒性的研究,X174
- 地克珠利对柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子甘油醛-3-磷酸脱氢酶的影响,S858.31
- PCV2对体外培养仔猪淋巴细胞钙信号的影响及其机理初探,S858.28
- 血管生成调节因子对性成熟小鼠卵泡及其血管发育的影响,S852.2
- β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响,S828
- 伏马菌素B1和黄曲霉毒素B1联合诱导Vero细胞凋亡的研究,S856.9
- 黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导锦鲤原代肝细胞凋亡机制的初步研究,S856.9
- 沉默BMPR-IB基因对猪卵巢颗粒细胞凋亡及BMP通路相关基因表达的影响,S828
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对鸡软骨细胞增殖、分化及凋亡的影响,S858.31
- Foxol对小鼠颗粒细胞凋亡的影响,S865.13
- 蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤生长的抑制作用及部分机制研究,R735.7
- 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
- WWOX在胆管癌组织中的表达及其对胆管癌细胞生物学行为的影响,R735.8
- 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导仓鼠肾细胞凋亡信号转导机制的研究,S856.9
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导人结肠癌细胞凋亡线粒体信号转导机制的研究,R735.35
中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com
|