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骨形态发生蛋白-4对大鼠肝源性肝干细胞增殖与分化的影响

作　者: 董娟娟
导　师: 申竑
学　校: 中南大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 骨形态发生蛋白-4 肝卵圆细胞 细胞增殖 细胞分化
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 15次
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内容摘要


目的：探讨骨形态发生蛋白-4对大鼠原位肝干细胞,即肝卵圆细胞HOC的增殖及分化的影响。方法：采用重组因子BMP4及重组腺病毒BMP4作用于大鼠HOC,以BMP-4拮抗剂重组因子Noggin及重组腺病毒BMP4-shRNA阻断BMP-4的作用以便实验对照,另外还设有空腺病毒组及未处理组作为试验对照。在实验不同时间点,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测BMP-4对HOC增殖的影响,透射电镜下观察细胞的超微结构特征,RT-PCR检测各试验组中不同HOC可能分化后细胞表型特异性分子标志物的mRNA表达情况,以过碘酸雪夫反应(PAS)检测细胞的糖原的合成与储积情况,并通过吲哚氰绿(ICG)摄取排泌试验检测细胞的代谢功能。结果：细胞增殖实验显示,在不同作用时间点,BMP-4干预组的细胞吸光值均高于抑制剂处理组和空白对照组。透射电镜下可观察到BMP-4干预后的HOC具有分化良好的上皮细胞的超微结构特征。RT-PCR显示BMP-4诱导HOC分化后,肝细胞特异性分子标志物的mRNA得到显著表达。PAS与ICG检测显示经BMP-4诱导分化的HOC具备正常肝细胞的糖原合成与吲哚氰绿摄取及代谢功能。结论：BMP-4可促进大鼠肝干细胞HOC的增殖,并诱导其向肝细胞表型定向分化,且经BMP-4诱导分化的HOC具备正常肝细胞的糖原合成与吲哚氰绿摄取及代谢功能。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
英文缩略词表  10-12
第一章 前言  12-14
第二章 材料和方法  14-24
  2.1 材料  14-16
  2.2 方法  16-24
第三章 结果  24-31
  3.1 BMP-4促进肝卵圆细胞的体外增殖  24-25
  3.2 BMP-4诱导肝卵圆细胞向上皮细胞分化  25-27
  3.3 BMP-4诱导肝卵圆细胞分化后的细胞具有显著的肝细胞表型  27-28
  3.4 经BMP4体外诱导分化的肝卵圆细胞能够合成糖原  28-29
  3.5 经BMP4体外诱导分化的肝卵圆细胞具备摄取代谢吲哚氰绿(Indocyanine green,ICG)的功能  29-31
第四章 讨论  31-34
第五章 结论  34-35
参考文献  35-40
综述 肝干细胞——肝卵圆细胞的研究进展  40-58
  参考文献  50-58
附录  58-59
致谢  59

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
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