学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

Visudyne光动力疗法预防晶状体后囊膜混浊的实验研究

作　者: 黎蕾
导　师: 王文吉
学　校: 复旦大学
专　业: 眼科学
关键词: 后囊膜混浊晶状体上皮细胞光动力疗法 Visudyne 体外实验细胞周期凋亡体内实验
分类号: R776
类　型: 博士论文
年　份: 2008年
下　载: 17次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的观察Visudyne光动力疗法(PDT)对离体培养的兔晶状体上皮细胞(RLECs)和人晶状体上皮细胞系(HLECs)的杀伤作用,确定杀伤LECs的最佳PDT参数,探讨PDT在体外杀伤LECs的作用机理,评价PDT在兔眼术中应用抑制后囊膜混浊(PCO)的有效性和安全性。方法(一)RLECs原代培养和传代培养,HLECs系传代培养,透射电镜观察细胞超微结构。MTT法测定单纯激光、不同浓度光敏剂和PDT对RLECs和HLECs的杀伤作用,并筛选最佳PDT参数。(二)流式细胞仪P1染色法分析PDT对HLECs细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态变化。(三)兔眼晶状体超声乳化摘除后囊袋内注入含有Visudyne的透明质酸钠,并行激光照射。术后6周和12周对PCO评估通过临床观察(分别对纤维化型PCO和再生型PCO进行分级)、照相、光镜组织学检查,同时测量中央后囊膜厚度,电镜观察角膜和虹膜超微结构变化。结果(一)在体外成功培养兔RLECs。MTT检测结果显示：单纯激光对RLECs和HLECs无杀伤作用。单纯光敏剂组：Visudyne浓度<0.125μg/ml,对细胞没有杀伤作用,>0.125μg/ml,杀伤率呈浓度依赖性。PDT组细胞杀伤率呈一定的浓度依赖性。(二) Visudyne光动力疗法作用于HLECs后,细胞周期分析显示G2期细胞数增多,而S期细胞数减少.。PDT后12h、24h和48h细胞凋亡率分别为77.17±2.55%、93.13±1.14%和97.47±0.90%。扫描电镜观察见：激光光斑未照射部位为正常HLECs,激光光斑照射部位细胞呈凋亡表现。(三)术后6周和12周,PDT治疗组和对照组比较：PCO程度明显轻,术后6周：纤维化型PCO和再生型PCO分级两组之间有统计学显著性差异(P<0.001),术后12周：两组之间比较：纤维化型PCO分级有统计学显著性差异(P=0.0306),再生型PCO分级无统计学显著性差异(p=0.1888)。Soemmering环形成情况PDT治疗组明显较对照组轻。PDT治疗组和对照组后囊膜厚度无差异(P=0.3619)。电镜观察显示正常角膜和虹膜超微结构。结论(一)Visudyne光动力疗法对LECs可以产生相当强的杀伤作用。杀伤晶状体上皮细胞的最佳参数为：当激光光斑直径5mm时,Visudyne 0.125ug/ml,激光波长689nm,光照剂量30J/cm2,光照强度500mW/cm2,光照持续时间60s,此时对RLECs和HLECs的杀伤率可达86.20%和88.80%。(二) Visudyne光动力疗法对HLECs的杀伤机理为抑制细胞增殖同时诱导细胞凋亡,细胞凋亡是PDT杀伤LECs过程中的一个早期重要事件。(三)Visudyne光动力疗法在兔眼术中应用能有效抑制PCO,并有足够的安全性。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-8
前言  8-11
第一部分 Visudyne光动力疗法对培养的晶状体上皮细胞的作用  11-29
  第一节兔晶状体上皮细胞和人晶状体上皮细胞的体外培养  11-21
  第二节 Visudyne光动力疗法对RLECs和HLECs体外生长的影响  21-29
第二部分 Visudyne光动力疗法杀伤晶状体上皮细胞机理的研究  29-44
  第一节 Visudyne光动力疗法对晶状体上皮细胞周期的影响  29-33
  第二节 Visudyne光动力疗法诱导晶状体上皮细胞凋亡的研究  33-44
第三部分 Visudyne光动力疗法抑制兔眼后囊膜混浊的研究.  44-61
  第一节 Visudyne光动力疗法的实施  44-48
  第二节 Visudyne光动力疗法抑制兔眼后囊膜混浊的有效性和安全性评估  48-61
参考文献  61-65
综述  65-84
  参考文献  78-84
在读期间发表论文情况  84-85
致谢  85-86

Visudyne光动力疗法预防晶状体后囊膜混浊的实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文