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苹果渣中多酚的提取分离技术研究
作 者: 李涛
导 师: 岳田利
学 校: 西北农林科技大学
专 业: 食品科学
关键词: 苹果多酚 提取分离 响应面法 高效液相色谱
分类号: TS255
类 型: 硕士论文
年 份: 2007年
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引 用: 2次
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内容摘要
我国苹果渣资源十分丰富,利用苹果渣生产具有生理活性的多酚物质具有广阔的市场前景。本研究即以苹果渣为原料,采用超声波提取法,通过响应曲面分析确定了苹果渣中多酚提取的最佳工艺条件;经过大孔吸附树脂初步纯化后的苹果多酚,再利用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对苹果多酚单体分子进行了分离研究;采用高效液相色谱法对收集的组分进行了测定。主要研究结果如下:1.考察了超声波功率、提取时间、温度、溶剂浓度、料液比和提取次数对苹果渣中多酚提取的影响,在单因素实验的基础上利用Plackett Burman设计法筛选出超声波提取苹果多酚的关键影响因子分别为温度、乙醇浓度和提取次数。2.通过响应面法(RSM)建立了超声波提取苹果渣中的多酚的二次多项数学模型,得出乙醇浓度和提取次数的交互作用显著,同时优化出超声波提取苹果渣中的多酚的工艺参数:温度61℃,乙醇浓度62%,提取次数2次。在此条件下多酚得率取得最大值1.21g/kg湿果渣。3.确定了一种新型的经Sephadex LH-20柱分离后所得洗脱液的合并方法,即通过紫外可见分光光度计跟踪扫描及测定其吸光值,根据其在最大吸收峰下的紫外吸收值曲线,结合Sephadex LH-20的分离原理,有选择性地合并各管洗脱液,从而能快速并有效地分离出单体,得到的单体纯度更高。4.确定了苹果多酚HPLC分析条件,以甲醇和1%乙酸水溶液作为流动相,采用梯度洗脱,0~8分钟甲醇浓度为0,8~40分钟甲醇浓度保持在35%,40分钟以后甲醇浓度为0,运行时间为45分钟,检测波长为280nm,柱温30℃,流速1.0mL/min,进样量20μL,七种多酚标准品的峰得到了较好的分离。5.苹果多酚液经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱分离后,根据确定的洗脱液合并方法,合并洗脱液得到了5个收集组分,通过HPLC对定性及定量分析,结果表明:金丝桃苷纯度为91%,产品得率为0.088g/kg果渣;咖啡酸纯度为87%,产品得率为0.051g/kg果渣。6、液相色谱分析结果表明,Sephadex LH-20凝胶树脂对苹果渣多酚有较好地分离效果,纯化所得单体的产物可达90%以上。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-10 第一章 文献综述 10-20 引言 10 1.1 苹果多酚及其性质 10-12 1.1.1 苹果多酚的组成及结构特征 10-12 1.1.2 苹果多酚的理化性质 12 1.2 苹果多酚的提取分离 12-14 1.2.1 超声波提取技术 12-13 1.2.2 超临界流体萃取技术 13 1.2.3 柱色谱技术 13-14 1.3 苹果多酚的功能活性 14-15 1.3.1 与抗氧化作用相关的功能 14 1.3.2 与抗过敏作用相关的功能 14 1.3.3 预防龋齿效果相关的功能 14 1.3.4 与消臭效果相关的功能 14 1.3.5 与美白效果相关的功能 14-15 1.3.6 与抗变异原相关的功能 15 1.3.7 与血压抑制相关的功能 15 1.4 苹果多酚的应用 15-19 1.4.1 在医学上的应用 15-16 1.4.2 在食品方面的应用 16-17 1.4.3 在化妆品方面的应用 17-18 1.4.4 其他方面的应用 18-19 1.5 本课题研究目的和意义 19-20 1.5.1 研究意义 19 1.5.2 主要内容 19-20 第二章 苹果多酚超声波提取条件优化研究 20-32 2.1 试验材料与仪器 20 2.1.1 试验材料 20 2.1.2 主要仪器及设备 20 2.1.3 主要试剂 20 2.2 试验方法 20-23 2.2.1 多酚测定标准曲线的绘制 20-21 2.2.2 多酚含量测定 21 2.2.3 苹果渣中多酚物质超声波提取条件优化试验 21-22 2.2.4 超声波提取苹果多酚关键影响因子筛选试验 22 2.2.5 超声波提取苹果多酚工艺条件试验 22-23 2.3 结果与分析 23-30 2.3.1 总苹果多酚测定标准曲线 23-24 2.3.2 单因素试验结果 24-26 2.3.3 超声波提取苹果多酚关键影响因子的确定 26-27 2.3.4 超声波提取苹果多酚的工艺参数优化 27-30 2.4 讨论 30-31 2.5 小结 31-32 第三章 苹果多酚单体的分离技术研究 32-40 3.1 试验材料与仪器 32 3.1.1 试验材料 32 3.1.2 主要仪器及设备 32 3.1.3 主要试剂 32 3.2 试验方法 32-34 3.2.1 苹果多酚的预处理 32-33 3.2.2 葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20 的分离 33-34 3.3 结果与分析 34-38 3.3.1 大孔树脂对苹果多酚的预纯化结果 34 3.3.2 葡聚糖凝胶 Sephadex LH-20 的分离 34-38 3.4 讨论 38-39 3.5 小结 39-40 第四章 苹果多酚HPLC 测定方法研究 40-46 4.1 试验材料与仪器 40 4.1.1 试验材料 40 4.1.2 主要仪器及设备 40 4.1.3 主要试剂 40 4.2 试验方法 40-41 4.2.1 苹果多酚各单体测定标准曲线的制作 40-41 4.2.2 HPLC 分析条件 41 4.2.3 样品的测定 41 4.3 结果与分析 41-45 4.3.1 定性测定 41-42 4.3.2 定量测定 42-45 4.4 讨论 45 4.5 小结 45-46 第五章 结论 46-47 5.1 超声波提取苹果渣中多酚试验结论 46 5.1.1 超声波提取苹果渣中多酚关键影响因子的筛选 46 5.1.2 超声波提取苹果渣中多酚的工艺参数优化 46 5.2 苹果多酚的单体纯化分离试验结论 46 5.3 苹果多酚 HPLC 测定方法的研究 46-47 参考文献 47-52 致谢 52-53 作者简介 53
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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 水果、蔬菜、坚果加工工业
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