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周期型马来丝虫Bm-GAPDH核酸疫苗在小鼠体内的免疫应答及Bm-CPI基因克隆的研究

作　者: 童海燕
导　师: 方政
学　校: 南通大学
专　业: 免疫学
关键词: 马来丝虫核酸疫苗 3-磷酸甘油醛脱氢酶免疫半胱氨酸蛋白酶抑制剂
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 8次
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内容摘要

丝虫病是一种严重危害人类健康的传染病,长期使用化学药物,使丝虫和蚊媒抗药性增强。研究和发展价格低廉、安全高效的丝虫疫苗是未来丝虫病防治工作中极有潜力的重要课题。近年来发展起来的核酸疫苗以其制备简便、实用高效等优点而备受重视,具有广阔的应用前景。现有的资料表明3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH)在寄生蠕虫和原虫中,可诱导实验动物产生保护性免疫应答,是一种重要的疫苗候选抗原。本研究成功构建了周期型马来丝虫核酸疫苗pcDNA3.1/Bm-gapdh。为了提高免疫效应,用免疫刺激序列CpG作为佐剂共同免疫BALB/c小鼠,用RT-PCR、MTT、ELISA检测GAPDH的免疫效应。结果表明,核酸疫苗pcDNA3.1/Bm-gapdh具有抗丝虫病候选DNA疫苗分子的潜力,增加佐剂后免疫效应有所增强。为了下一步的疫苗设计作前期准备,本实验还构建了周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine protease inhibitor,CPI)的重组质粒pGEM-T/Bm-cpi,并送基因公司测序。再根据测序结果,推测其氨基酸序列,然后利用相关的软件预测它的B细胞表位。

全文目录

英文缩略词表(Abbreviation)  6-7
中文摘要 (Abstract in Chinese)  7-8
英文摘要(Abstract in English)  8-9
前言（Introduction）  9-12
实验一周期型马来丝虫 Bm-GAPDH 基因真核载体的构建  12-27
  材料和方法（Material and Method)  12-19
  结果（Results）  19-25
  讨论(Discussion)  25-27
实验二周期型马来丝虫核酸疫苗pcDNA3.1-gapdh 免疫BALB/c 小鼠的免疫应答研究  27-37
  材料和方法（Material and Method)  27-31
  结果（Results）  31-34
  讨论(Discussion)  34-37
实验三周期型马来丝虫 Bm-CPI 基因克隆及其序列分析  37-51
  材料和方法（Material and Method)  37-39
  结果（Results)  39-49
  讨论(Discussion)  49-51
结论(Conclusion)  51-52
参考文献 (References)  52-57
综述(Review)  57-61
综述参考文献(References)  61-64
致谢(Acknowledgements)  64

周期型马来丝虫Bm-GAPDH核酸疫苗在小鼠体内的免疫应答及Bm-CPI基因克隆的研究

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