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人肉瘤长春新碱耐药细胞系MS5/VCR的建立

作 者: 王朋朋
导 师: 杨立业
学 校: 汕头大学
专 业: 儿科学
关键词: 肿瘤干细胞 多药耐药 长春新碱 肉瘤细胞系 异常血红蛋白 Hb G-Chinese PCR 限制性内切酶
分类号: R73-3
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 15次
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内容摘要


目的:体外建立人肉瘤MS5细胞系长春新碱耐药细胞株,观察其生物学特性和体内的成瘤能力。方法:本论文采用低浓度加量持续诱导法建立人肉瘤MS5细胞的耐长春新碱模型,将其命名为MS5/VCR。光镜下观察细胞的形态,体外药物敏感实验比较两株细胞对化疗药物的敏感性,将MS5和MS5/VCR细胞皮下接种8只裸鼠,55天后杀死裸鼠观察肿瘤形成肿瘤的大小,免疫组织化学法观察移植瘤mdr-1表达。结果:肉瘤细胞MS5经VCR诱导7个月后,获得肉瘤长春新碱耐药细胞株MS5/VCR,MS5/VCR在长春新碱浓度为6μg/ml的培养基中稳定生长,与MS5细胞相比,耐药细胞株形态稍圆。体外药物敏感实验结果显示MS5/VCR细胞株对VCR有一定的耐药性,肿瘤种植实验显示MS5/VCR细胞比MS5细胞有较强致瘤性,免疫组化结果显示mdr-1在MS5和MS5/VCR移植瘤均有表达。结论:1、体外浓度梯度递增法可诱导建立人肉瘤MS5长春新碱耐药细胞株MS5/VCR。2、人肉瘤MS5长春新碱耐药细胞株MS5/VCR体外克隆和体内成瘤能力强于其亲本细胞MS5,可能含有较多的肿瘤干细胞。目的:本实验应用血液学和DNA分析的方法对3例异常血红蛋白Hb G-Chinese进行鉴定。方法:醋酸纤维膜电泳的方法发现了异常血红蛋白。应用聚合酶链反应、限制性内切酶酶切和DNA序列测定来确定存在Hb G-Chinese基因突变。结果:确定了3例Hb G-Chinese携带者。结论:PCR是确定基因突变导致血红蛋白变异的一种简单、快捷、又便宜的方法,Hb G-Chinese携带者α- globin-2 G到C的替代产生一个pstⅠ酶切位点。

全文目录


第一部分  7-33
  中文摘要  7-8
  英文摘要  8-9
  第1章 前言  9-11
  第2章 人肉瘤长春新碱耐药细胞系M55/VCR 的建立  11-33
    2.1 材料与方法  11-15
    2.2 结果  15-18
    2.3 讨论  18-23
    2.4 结论  23-24
    2.5 附图  24-28
    2.6 参考文献  28-33
第二部分  33-53
  中文摘要  33-34
  英文摘要  34-35
  第1章 前言  35-37
  第2章 潮州地区发现的3 例异常血红蛋白Hb G-Chinese 的鉴定  37-53
    2.1 材料和方法  37-42
    2.2 结果  42-43
    2.3 讨论  43-46
    2.4 结论  46-47
    2.5 附图  47-51
    2.6 参考文献  51-53
English Version  53-58
  References  57-58
综述  58-67
  参考文献  64-67
致谢  67-68
研究生阶段发表论文情况  68-69
个人简历  69

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 肿瘤学实验研究
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