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冰鲜鸡肉腐败微生物分析及其减菌剂的研究

作　者: 孙彦雨
导　师: 周光宏
学　校: 南京农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 冰鲜鸡肉微生物污染化学减菌剂优势腐败菌保鲜 PCR-DGGE
分类号: TS251.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

冰鲜鸡肉,是指严格执行兽医检验检疫制度,对屠宰后的禽胴体进行迅速冷却处理,使胴体温度迅速降为0-4℃,并在后续加工、流通和销售过程中始终保持0-4℃范围内的生鲜鸡肉。加工冰鲜鸡肉消耗能源少、成本低,但销售价格高,它不仅保持了原有的色泽和香味,更保持了冻鸡肉解冻时易流失的营养成份,口感、风味与新鲜度等都优于冻鸡肉,且食用方便,避免了冻品食用前的解冻过程,深受消费者欢迎。但是,冰鲜鸡肉货架期短。因此,在屠宰、分割、冷藏、运输和销售一系列过程中关注冰鲜鸡肉的微生物污染状况,采取有效的措施减轻污染程度并防止二次污染,对于保证产品安全卫生、延长产品货架期有着重要的意义。本研究在某大型肉鸡屠宰企业取样,采用传统培养技术和分子技术相结合的方法分析冰鲜鸡肉在低温低氧分压贮藏条件下菌相变化趋势,并确定优势腐败菌。分析肉鸡屠宰加工过程中不同操作点微生物数量及种类变化情况,确定关键控制点。研究不同化学减菌剂对优势腐败菌的保鲜抑制作用,再根据栅栏技术对几种化学减菌剂进行复配,得到复配减菌剂的浓度的最优比,找到一种实用有效的化学减菌剂配方。1.应用基于16SrDNA的变性梯度凝胶电泳指纹图谱技术(DGGE)对冰鲜鸡肉微生物多样性进行研究。分别取鸡胸肉和鸡腿肉贮藏0d,3d,5d,7d和9d的样品,提取样品总DNA,通过PCR扩增、变性梯度凝胶电泳,将16SrDNA(V6-V8区)的PCR扩增片段割胶测序确定样品中的微生物群落,与传统培养方法结果进行比较。传统培养方法结果表明：鸡胸肉和鸡腿肉在低温低氧分压条件下贮藏,导致腐败的优势腐败菌相差不明显,且变化趋势相一致；DGGE指纹图谱结果表明,初始污染数量较多的微生物不一定是优势腐败菌,能适应低温低氧分压的微生物最终成为优势腐败菌,且鸡胸肉和鸡腿肉的优势腐败菌有一定差异。传统培养技术和DGGE割胶测序所得优势腐败菌的菌相不完全相同,综合两种不同研究方法,确定冰鲜鸡肉优势腐败菌为乳酸菌,肠杆菌,热杀索丝菌,腐败希瓦氏菌,毗邻颗粒链菌和肉杆菌。2.采用变性梯度凝胶电泳指纹图谱技术研究肉鸡屠宰加工过程中不同操作点微生物的污染情况,以确定关键控制点。分别采取肉鸡屠宰加工过程中胴体表面、工人手表面、预冷池中的水、空气中的样品以及真空包装贮藏过程中样品,然后进行DGGE指纹图谱分析。结果表明：肉鸡的屠宰加工过程包括浸烫脱毛、倒挂、去内脏、冷却和分级包装,不同处理会对肉鸡胴体表面的污染微生物产生不同的影响,去内脏后肉鸡胴体表面微生物的种类和数量都有所增加,但预冷能有效减少肉鸡胴体表面微生物的种类和数量,空气中微生物数量随着生产时间的延长不断增加,这些操作点也成交叉污染的地方,尤其工人手表面是引起交叉污染最主要的原因。3.几种化学减菌剂对冰鲜鸡肉的减菌作用,主要包括两方面内容：1、应用单因子试验配制五种不同的化学减菌剂,用浸泡方式对肉样进行处理,以菌落变化数为指标,确定各化学减菌剂的减菌效果,2、利用四因子三次正交旋转设计,探讨乳酸,醋酸,磷酸钠和酸化亚氯酸钠复合减菌剂最优比,并确定各种化学减菌剂在复配中所起的作用。结果表明：乳酸,醋酸,次氯酸钠,磷酸钠和酸化亚氯酸钠对优势腐败菌都有一定的抑制作用,但抑制效果不一样。在乳酸,醋酸,酸化亚氯酸钠,磷酸钠四种减菌剂优化设计时,乳酸对优势腐败菌的影响最大,酸化亚氯酸钠作用最小,乳酸,醋酸,磷酸钠,酸化亚氯酸钠在编码值范围内菌落数对数值均有最小值,磷酸钠加入量的变化对复合化学减菌剂的减菌效果影响最大,最佳浓度比为乳酸的浓度为1.598%,酸化亚氯酸钠的浓度为0.07683%,磷酸钠的浓度为8.732%和醋酸的浓度为1.805%。

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目录 4-7摘要 7-9ABSTRACT 9-12缩写符号 12-13引言 13-15文献综述 15-37 1 我国肉鸡产业发展的概况及存在的问题 15-17 1.1 我国肉鸡产业的发展情况 15-16 1.2 我国肉鸡产业存在问题 16-17 2 冰鲜鸡肉的含义及特点 17-18 2.1 冰鲜鸡肉的含义 17 2.2 冰鲜鸡肉的特点 17-18 3 肉及肉制品微生物来源 18-19 3.1 内源性污染 18-19 3.2 外源性污染 19 4 肉及肉制品污染微生物种类 19-20 5 PCR-DGGE技术 20-24 5.1 PCR技术 20-21 5.2 DGGE技术的发展及原理 21-22 5.3 PCR-DGGE技术在肉品微生物研究中的应用 22-23 5.4 DGGE技术的优点 23 5.6 DGGE技术的局限性及优化 23-24 6 屠宰加工过程微生物污染及菌相变化 24-25 6.1 屠宰加工过程对微生物数量的影响 24 6.2 屠宰加工过程操作工序点对微生物多样性和数量的影响 24-25 7 肉及肉制品保鲜理论 25-27 7.1 危害分析关键控制点 25 7.2 良好操作规范 25-26 7.3 栅栏技术 26 7.4 微生物预报技术 26-27 8 化学减菌剂 27-29 8.1 乳酸 27-28 8.2 其他的化学减菌剂 28-29 9 本研究的意义 29-30 参考文献 30-37第一章冰鲜鸡肉贮藏过程中微生物菌相变化分析 37-49 1 材料与方法 37-40 1.1 材料与试剂 37-38 1.2 仪器与设备 38 1.3 方法 38-40 1.4 数据处理 40 2 结果与分析 40-45 2.1 微生物传统培养数据分析 40-42 2.2 DGGE图谱分析 42-45 3 讨论 45 4 结论 45-47 参考文献 47-49第二章肉鸡屠宰过程中腐败微生物的污染情况分析 49-61 1 材料与方法 50-52 1.1 材料与试剂 50 1.2 仪器与设备 50 1.3 方法 50-52 2 结果与分析 52-58 2.1 预冷池中水污染情况分析 52-54 2.2 不同工序后肉鸡胴体表面微生物污染情况分析 54-55 2.3 不同工人手表面微生物污染情况分析 55-57 2.4 空气中污染微生物情况分析 57-58 3 讨论 58 4 结论 58-59 参考文献 59-61第三章化学减菌剂对冰鲜鸡肉减菌效果的研究 61-75 1 材料和方法 62-64 1.1 材料 62 1.2 仪器与设备 62 1.3 方法 62-64 2 结果与分析 64-71 2.1 次氯酸钠对主要腐败菌的抑制作用 64-65 2.2 磷酸钠对主要腐败菌的抑制作用 65-66 2.3 醋酸对主要腐败菌的抑制作用 66-67 2.4 乳酸对主要腐败菌的抑制作用 67 2.5 酸化亚氯酸对主要腐败菌的抑制作用 67-68 2.6 复配抑菌剂最佳配比的优化 68-71 3 讨论 71-72 4 结论 72-73 参考文献 73-75全文结论 75-77致谢 77-79硕士期间发表文章 79

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